注射用蜂毒制剂中蜂毒肽和蜂毒明肽的HPLC检测方法建立及验证

陈若尘 王丽娜 李丽红 任凤芝

摘要：目的：对注射用蜂毒制剂中蜂毒肽及蜂毒明肽的含量HPLC检测方法的建立及验证。方法：采用高效液相色谱法，以C8色谱柱，进行不同液相条件洗脱检测，确定方法后进行方法学研究。结果：建立了适宜的HPLC检测方法，并完成了方法验证。结论：本研究结果确定了注射用蜂毒制剂中蜂毒肽及蜂毒明肽的含量HPLC检测方法。

关键词：蜂毒肽;蜂毒明肽;HPLC检测方法

Abstract： Objective：To establish and verify an HPLC method for the determination of melittin andapamin in bee venom preparations for injection. Methods：High Performance Liquid Chromatography with C8 column was used for elution detection under different liquid conditions. After the method was determined， the methodology was studied. Results： A suitable HPLC method was established and verified. Conclusion：The results of this study determined the HPLC method for the determination of melittin andapamin in bee venom preparations for injection.

Key words： Melittin; Apamin; HPLC method

【中图分类号】R97             【文献标识码】A             【文章编号】2107-2306（2021）07--02

蜜蜂毒是蜜蜂科昆虫中华蜜蜂或意大利蜜蜂尾部蛰刺腺内的有毒液体，性味辛苦，平，功效祛风湿，止疼痛。主治风湿性关节炎，腰肌酸痛，坐骨神经痛[1]。蜜蜂毒中含有多种不同化学结构的生物活性物质，主要有：蜂毒素（Melittin），蜂毒明肽（apamin），MCD-肽（mast cell degranulating peptide），心脏肽（cardiopeptide），含组胺肽（histapeptide），赛卡平（secapin），托肽平（tertiapin）、阿度拉平（adolapin）等，此外还含有组胺，磷脂酶 A2及透明质酸酶等[2]。

以 HPLC 法测定提取物中蜂毒素的含量，方法准确、简便、重现性好、灵敏度高，可为蜂毒素产品质量标准制定提供可靠的依据，因此建立了注射用蜂毒制剂中蜂毒肽、蜂毒明肽含量测定的方法。注射用蜂毒一般使用指纹图谱方法进行质量研究，使用该方法用于定量测定时，蜂毒肽及蜂毒明肽与其周围杂质分离较差，故需重新确定检测方法。液相方法检测注射用蜂毒时，噪音较大，使得蜂毒肽及蜂毒明肽的定量限较高，因此需要提高样品溶液的浓度进行检测。

1、仪器及试剂

2、HPLC分析方法的确定

通过查阅相关文献[3]，现有……