测定龙胆草提取液中龙胆苦苷含量方法的建立

胡永志 黄 静 刘文佳 梁雪松 黄光伟

(柳州两面针股份有限公司，广西 柳州 545001)

引言

龙胆为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag.、龙胆Gentiana scabra Bge.、三花龙胆Gentiana triflora Pall或坚龙胆Gentiana rigescens Franch.的干燥根和根茎。龙胆草在中药制剂中使用非常广泛，且用量较大。目前药典中规定，龙胆草的药用部位为干燥根[1-2]，而大量的茎、叶、花则弃之。研究发现其根及根茎含有裂环环烯醚萜苷、生物碱、黄酮、甾体、香豆素及内酯等化合物[3]。其中龙胆苦苷含量最高，被《中国药典》定为质量标准控制的目标成分[4]。龙胆苦苷为环烯醚萜类化合物，现代药理学研究表明其具有保肝、利胆、健胃、抗炎、抗菌等功效[5-8]。本研究采用高效液相色谱法测定龙胆提取液中龙胆苦苷的含量，为龙胆提取液中龙胆苦苷含量的检测提供可靠的手段，以期为开发该药材药用价值提供参考依据。

1 仪器与材料

Agilent 1260 Infinity Ⅱ高效液相色谱仪系统(G7129A 1260Vialsampler, G7111 1260 Quat Pump VL, G7114A 1260VWD)；梅特勒-托利多ML204型电子天平；天津奥特赛恩斯仪器有限公司AS3120型超声波清洗器；梅特勒-托利多FE20型实验室pH计；龙胆苦苷对照品，中国食品药品检定研究所(含量以97.6%计)；Fisher chemical色谱纯甲醇；超纯去离子水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)；流动相为乙腈(B)-水(A)，流动相梯度如下表1所示；流速为1mL/min；柱温35 ℃；检测波长为270 nm；进样量20 μL。按此色谱条件下测定，龙胆提取液样品色谱图见图1。

表1 流动相梯度

2.2 对照品溶液的制备

精密称取龙胆苦苷对照品0.01 g，置50mL容量瓶中，加入适量甲醇，振荡溶解，再加甲醇至刻度，摇匀，备用。

2.3 供试品溶液的制备

准确称取龙胆提取液0.1 g，置10mL容量瓶中，加入甲醇至刻度，摇匀，用0.45 μm滤膜过滤，滤液为供试品溶液。……