一例伪狂犬病毒野毒株感染病例的病原学诊断

曾繁荣，尹家银，唐青海※，薛娇雄，喻 娇，刘雪晴，唐斯萍，杨 海，王芳宇

(1.湖南省衡阳市畜牧水产事务中心，湖南 衡阳 421008；2.南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室，衡阳师范学院生命科学与环境学院，湖南 衡阳 421008)

伪狂犬病（Pseudorabies，PR）是危害我国养猪业的主要病毒性之一，该病由伪狂犬病毒（Pseudorabies virus，PRV）感染引起。以往，PRV主要引起仔猪和母猪发病，但由于长期免疫压力、病毒变异，现今，不同日龄猪均易感，育肥猪亦可表现为呼吸道综合症、发育障碍、死亡率较高。尤其是自2011年以来，一种由伪狂犬病毒变异毒株引起较为严重的母猪繁殖障碍和初生乳猪死亡[1]。这些年来，我国普遍接种减毒活疫苗或基因缺失疫苗对PR的防控起到了显著效果，尽管如此，PRV野毒依然呈地方性的流行或散发[2,3]。最近的研究表明Bartha K61株活疫苗对流行变异毒株不能提供完全保护[4]，这给PR的防控提出了新的挑战。

本研究拟对一例育肥猪疑似PRV感染病例进行实验室检测、开展病原分离鉴定和病原培养特性研究诊断，为临床PR防控提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

Vero细胞由南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室培养保存；PRV强毒阳性质粒和PRV阳性血清由衡阳市畜牧水产事务中心兽医实验室保存；血液/细胞/组织DNA提取试剂盒购自天根生化科技（北京）有限公司；胎牛血清购自杭州四季青生物工程材料有限公司；DMEM培养基Thermo Fisher Scientific公司；Premix r Taq酶购自宝生物工程（大连）有限公司；HRP-SPA购自Invitrogen公司；AEC显色试剂购自Sigma公司。

1.2 方法

1.2.1 病……