西藏白肉灵芝菌丝体发酵条件初探

高 磊

（西藏自治区农牧科学院蔬菜研究所，西藏 拉萨 850000）

灵芝，属于常见的大型真菌。灵芝中主要的活性物质为灵芝多糖和三萜，具备抗肿瘤、抗氧化、保肝护肝、调整免疫功能等很好的功效。由于人工栽培耗时久，因此采取液体进行发酵，从而获得白肉灵芝菌丝体和发酵产物，合适的发酵条件可有效地促进菌丝体生长，提高菌丝体产量。本实验主要从时间、碳源、氮源、pH 值等方面分别对白肉灵芝菌丝体液体发酵条件进行研究。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试灵芝为西藏白肉灵芝，由西藏自治区农牧科学院蔬菜研究所食用菌实验室提供。供试培养基：①PDA培养基；②加富液体培养基、PDA基础上添加蛋白胨0.2%、磷酸二氢钾0.046%、磷酸氢二钾0.1%、硫酸镁0.05%、维生素B每1000 mL 0.03 mg；③液体培养基，不含琼脂的PDA培养基。

1.2 试验方法

1.2.1 菌种制备

斜面菌种（一级种）制备：选用实验室保藏菌株试管斜面，通过转管培养获得。

液体菌种制备：使用容量为250 mL 的三角瓶，盛装PDA 液体的液体培养基100 mL，无菌条件接入约0.5 cm × 0.5 cm 白肉灵芝一级种3 块，使用恒温摇床时，调节温度为25 ℃、150 r/min，培养5 d，得到我们需要的液体菌种。

1.2.2 菌丝体干质量测定方法

将获得的液体菌种通过离心机，在3000 r/min转速下离心10 min后，去上清，用灭菌水反复清洗，再使用高速离心机，在3000 r/min 转速下，离心10 min 后，使用吸水纸吸干水分，置于灭菌的平板内，放置于60 ℃干燥箱烘干，使用精密电子天平称质量。

1.2.3 pH值测定

采用实验室常用pH 计测量发酵后液体的pH值。

1.2.4 白肉灵芝菌丝体生长

曲线图绘制过程，需要以250 mL 三角瓶作为培养耗材，并在其瓶内加入加富液体培养基100 mL，共计30 瓶，使用压力灭菌器进行高压灭菌1 h。……