甘肃、青海和宁夏地区牛病毒性腹泻病毒Erns基因的变异分析

高闪电，王锦明，田占成，独军政，王建东，常惠芸，关贵全，李有全，殷 宏, 2*

(1.中国农业科学院兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室，兰州 730046；2.江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州 225009；3.宁夏农林科学院动物科学研究所，银川 750002)

牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus，BVDV)属于黄病毒科(Flaviviridae)、瘟病毒属(Pestivirus)，主要感染牛，导致腹泻、呼吸道症状、流产或黏膜糜烂[1]。病毒基因组RNA包含5′UTR、开放阅读框以及3′UTR保守的结构，编码C、Erns、E1、E2四种结构蛋白和7～8种非结构蛋白。Erns、E1、E2镶嵌在病毒脂质双层囊膜上，与囊膜内由C蛋白和病毒RNA构成的衣壳共同组成完整的病毒粒子[2]。E2是BVDV最主要的抗原蛋白，在诱导宿主体液免疫和细胞免疫中发挥重要的作用，是决定疫苗免疫保护的关键蛋白。Erns为高度糖基化蛋白，具RNA酶活性，除参与病毒粒子组成，还可从感染细胞分泌至胞外。Erns作为瘟病毒特有蛋白，也可诱导中和抗体的产生，可作为病毒持续感染的标志物，广泛用于BVDV持续与急性感染的鉴别诊断[3]，但相关研究发现检测Erns的免疫组织化学法或商品化试剂盒存在漏检现象，表明Erns蛋白在毒株之间存在抗原差异[4]。

BVDV分离株间抗原性、基因组核苷酸存在较大差异，目前主要依据5′UTR、N基因核苷酸差异将其分为BVDV-1、BVDV-2、BVDV-3基因型以及BVDV-1a～BVDV-1w、BVDV-2a～2d等基因亚型[5-6]。根据分离株的细胞培养特性，可将BVDV分为非致细胞病变(ncp)和致细胞病变(cp)两种生物型，田间分离株多为ncp型且与牛急性感染、流产和持续性感染(PI)有关，cp型BVDV感染PI牛可导致黏膜病。在我国报道的BVDV分离株表现为较高的亚型多样性，可分为13种基因亚型(BVDV-1：11种；……