番茄抗斑萎病毒病基因Sw-5的分子标记及检测

王涛，张子君，张逸鸣，王晓峰，邹庆道

（辽宁省农业科学院蔬菜研究所，辽宁沈阳 110161）

番茄斑萎病毒（TSWV）是一种极具破坏性的农作物病毒病原，威胁着全世界的番茄生产。TSWV 是番茄斑萎病毒属（Tospovirus）的一种RNA 病毒，属于布尼亚病毒科（Bunyaviridae）。番茄感染TSWV 后茎和叶片发育不良，叶片呈青铜色、卷曲、出现坏死斑点和条纹，产量也随之大幅度减少甚至绝收。TSWV的传播媒介主要是西花蓟马，媒介一旦获毒便终生带毒，带毒的成年蓟马感染一棵健康的植株只需30 min[1-2]。由于TSWV的寄主范围较广，包含了84 个科1 090 种植物[3]，目前还没有有效的防控措施。

培育抗病番茄新品种是预防TSWV 最直接有效的方法，研究者在栽培番茄和野生番茄中均发现有TSWV的抗源。迄今为止，已报道的抗病基因有8 个，包括Sw1a，Sw1b，sw2，sw3，sw4，Sw-5，Sw-6 和Sw-7[4-5]，其中只有在秘鲁番茄中发现的Sw-5 基因广泛应用在番茄育种中。Sw-5对TSWV的各种小种均表现出较好的抗性，并且对番茄斑萎病毒属的其他病毒也具有抵抗作用。携带Sw-5的植株可以有效地限制TSWV的扩散，仅在局部位置出现轻微过敏性症状。研究者利用RFLP 分子标记将Sw-5 定位在第9 染色体临近端粒区域的长臂上，位于标记CT71 和CT220 之间[6]。随后Spassova 等[7]利用图位克隆法克隆了该基因，Sw-5 和其他许多抗性基因一样，属于CC-（NB-ARC）-LRR 结构。此外，研究者还发现Sw-5 基因有5 个连锁的拷贝序列（Sw-5a-Sw-5e），通过转基因验证，单独Sw-5b 同样具有抗病性。Dianese 等利用Sw-5 序列的一个InDel 突变，开发出一个共显性CAPS 标记，该标记的扩增子包含了Sw-5b 启动子的一段保守序列[8]。Lee 等利用Sw-5b的DNA序列，开发了一个SNP 标记，可以用于鉴定抗感番茄材料[2]。……