环状RNA circUGGT2对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

赖家骏 周新栋 胡志伟 何盛泉 李定云 翁伟明 曾德强 朱晓峰 张涛 龙飞

结直肠癌（colorectal cancer，CRC）是全球第三大常见癌症，也是第二大癌症相关死亡原因［1］。据估计，我国2015年CRC的发病例数约为38.8万例，死亡约为18.7万例，均居全部恶性肿瘤前列［2］。因此，深入探讨CRC发生发展的分子机制，寻找CRC早期诊断和复发转移靶点具有重要意义。环状RNAs（circular RNAs，circRNAs）是一类不具有5′末端帽子和3′末端多聚A尾巴，并以共价键形成环状结构的非编码RNAs分子。circRNAs是一类新的内源性RNAs，大量研究［3⁃5］显示，circRNAs与肿瘤发生发展密切相关，其在CRC中的作用也日益受到关注。本课题组前期从GEO数据库的CRC circRNA芯片数据（GSE126094）［6］筛选出了237个在CRC组织中显著上调的circRNAs（log2FC≥2，P＜0.05），其中包括circUGGT2（circBase ID为hsa_circ_0008274）。但是，circUGGT2对CRC生物学行为的影响尚未知。本研究在CRC组织和细胞系中检测circUGGT2的表达，并探讨其对CRC细胞增殖、迁移和侵袭的影响，以期为CRC诊断和治疗寻找新的靶点。

1 材料和方法

1.1 组织标本、细胞系及主要试剂

收集2018年9月至2019年3月在粤北人民医院胃肠外科接受手术治疗的45例CRC患者的CRC组织和癌旁组织（距癌灶边缘5 cm以上的结直肠黏膜组织）标本。所有患者术前均未接受化疗、放疗等抗肿瘤治疗。本研究通过粤北人民医院伦理委员会审批，患者知情同意。

人正常结肠上皮细胞株NCM460和4种CRC细胞株HT29、HCT116、SW480、SW620均购自南京凯基生物技术股份有限公司。胎牛血清购自以色列Biologi⁃cal Industries公司；RPMI⁃1640培养基、McCoy′s 5A培养基、L15培养基均购自美国Gibco公司；TRIzol试剂、LipofectamineTM3000试剂均购自美国Invitrogen公司；核酶（RNase R）购自广州吉赛生物科技股份有限公司；放线菌素D（Act.D）购自美国Sigma公司；……