重组人粒细胞刺激因子促进骨髓间充质干细胞修复急性肺损伤的机制研究

乔广明，王志敏，张雪欣，时亚娟，齐晓玉，贠美玲，岳智杰

急性肺损伤是多种因素引起的急性弥漫性肺损伤，病情严重时可能会出现急性呼吸窘迫综合征[1]。急性肺损伤发病可能与细胞凋亡、炎症反应等有关[2]。目前急性肺损伤的治疗方式包括药物治疗、机械通气，但病死率仍较高[3]。重组人粒细胞集落刺激因子是干细胞动员剂，能促进干细胞及造血祖细胞生长、分化和成熟，对干细胞移植具有重要作用[4]。有研究发现，重组人粒细胞集落刺激因子能有效减缓肺损伤的炎症反应[5]。骨髓间充质干细胞是一种多功能细胞，具备成骨细胞、神经细胞等多种细胞的分化能力[6]。研究显示，骨髓间充质干细胞移植能减缓急性肺损伤大鼠的炎症反应[7]。故本研究通过构建急性肺损伤模型，探讨重组人粒细胞刺激因子促进骨髓间充质干细胞修复急性肺损伤的机制。

1 材料与方法

1.1主要试剂 重组人粒细胞刺激因子购自广州拜迪生物医药有限公司；TUNEL试剂盒购自罗氏公司；p53抗体、Bax抗体、Bcl-2抗体和GAPDH抗体购自英国Abcam公司；肿瘤坏死因子-α(TNF-α)试剂盒、白细胞介素-1β(IL-1β)试剂盒、IL-10试剂盒购自R&D公司；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.2实验动物和分组 实验动物选择清洁级BALB/C小鼠，4～6周龄，体质量18～22 g，购自北京华阜康生物公司，许可证号为SYXK(京)2014-0004。开始实验前7 d，小鼠正常饮食和进水。

1.3骨髓间充质干细胞制备 选择5只小鼠称取体质量，然后腹腔注射戊巴比妥钠30 mg/kg麻醉处死小……