章 涵, 赵玉霞, 杨惠然, 董 雪
(信阳职业技术学院,河南 信阳 464000)
糖尿病肾病是临床常见疾病类型,随着病情发展可降低患者肾功能。蛋白滤过的最后屏障是足细胞,若其发生损伤可导致肾功能异常,进而促进糖尿病肾病的发生,故减轻其损伤成为治疗糖尿病肾病的重要方法。研究表明,高血糖可引发氧化应激,从而加重肾损伤,最终促进糖尿病肾病发生[1-3]。红花CarthamustinctoriusL.属于菊科植物,其主要活性成分为红花黄色素,具有抗炎、抗氧化应激、抗肿瘤等作用,并可保护心血管、神经系统[4],但尚无关于该成分对足细胞损伤的作用。
长链非编码RNA FGD5反义RNA 1(lncRNA FGD5-AS1)在牙周炎中表达下调,并可能通过调控miR-142-3p/细胞因子信号抑制分子6(SOCS6)分子轴从而减缓牙周炎的发展[5]。生物信息学分析显示,微小RNA-302a-3p(miR-302a-3p)可能是FGD5-AS1的靶基因,在高糖诱导的肾小管上皮细胞中表达上调,并可能参与糖尿病肾病的上皮-间质转化过程[6]。但红花黄色素是否通过调控FGD5-AS1/miR-302a-3p通路而影响足细胞损伤尚不明确,故本实验探讨该成分对高糖诱导小鼠足细胞损伤的影响,分析其机制是否与调控FGD5-AS1/miR-302a-3p通路相关,以期为糖尿病肾病防治提供新方向。
1.1 细胞 小鼠足细胞MPC5,购自美国ATCC公司。
1.2 试剂与药物 红花黄色素(批号180120)购自山东丰泰生物科技有限公司,采用无菌生理盐水溶解红花黄色素,制成质量浓度为30 mg/mL的母液,置于4 ℃冰箱中保存。葡萄糖(批号G8270)、甘露醇(批号PHR1007)购自美国Sigma公司;乱序无意义阴性序列(si-NC)、miR-302a-3p寡核苷酸模拟物(miR-302a-3p mimics)及mimic 阴性对照序列(miR-NC)、FGD5-AS1小分子干扰RNA(si-FGD5-AS1)购自广州锐博生物科技有限公司;……