意大利蜜蜂amLDH基因的克隆与表达分析

欧阳霞辉， 郑天宇， 徐文凯， 郑相相

(西北民族大学 生命科学与工程学院，甘肃 兰州 730030)

乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)是糖酵解途径中的关键酶之一[1]，普遍分布于动物组织和各种微生物体内，可借助辅酶(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的氧化型或还原型(NAD+或NADH)参与糖酵解中丙酮酸和乳酸的相互转化[2]。在含氧丰富的组织中可将乳酸氧化为葡萄糖，从而为三羧酸循环提供充足原料；在缺氧状态下可将丙酮酸转化为乳酸，从而保障碳代谢平衡[3-5]。LDH基因编码的同工酶的生化特性多样化，在不同的组织类型和发育状态下，其表达水平差异显著[6-7]。

自Abu-Shumays等[6]提出LDH活性随类固醇激素(20-羟基蜕皮酮)的作用而增加以来，出现了许多其他物种LDH基因被成功克隆并进行深入研究的报道[8]，如人[9]、鼠兔[10]、大鼠[11]、白绒山羊[12]和牦牛[13]等。Makler等[14]研究表明，寄生虫血症和寄生虫LDH活性之间存在相关性。魏琳娜等[15]研究表明，乳酸脱氢酶在肝组织中的表达可催化无氧糖酵解为机体生命活动提供至少24%的ATP，从而增强对低氧环境的适应。湛润生等[16]对山西黑猪不同器官组织LDH同工酶的研究证明不同器官组织中LDH酶活性、种类和相对含量都存在显著差异。黄兴等[17]克隆了类乌齐牦牛乳酸脱氢酶基因，且其在牦牛肺脏中高表达，与牦牛的抗缺氧性状有关。LDH在果蝇胚胎发育的能量代谢中发挥着重要作用[18]，且有研究表明LDH的表达与细胞周期相关[12]，而在蜜蜂等昆虫中还鲜有报道。

本研究以经济昆虫意大利蜜蜂(Apismellifera)为研究对象……