HBV对HOXA10表达的影响及其机制研究

宋 惠， 杨 兰， 徐莉敏， 沈振华， 刘倩倩， 刘兴晖

（上海市浦东新区公利医院检验科，上海 200135）

有研究结果显示，乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染者肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）的发病率比普通人群高出200倍，我国HCC患者中80%有HBV感染史[1]。HBV感染引起HCC的机制目前尚不明确。同源框蛋白A10（homeobox protein A10，HOXA10）属于人类的同源框（homeobox，HOX）基因，是DNA结合转录因子，拥有序列特异的DNA结合活性，参与生殖道发育、胚胎植入的调控及细胞定向分化和增殖，在胚胎发育、分化、癌症和造血系统疾病中发挥重要作用[2]。目前，HOXA10在HBV感染中的作用鲜有报道。ZHU等[3]采用基因芯片筛选到HOXA10在整合了HBV全基因组的HepG2.2.15细胞株中呈高表达。为此，本研究拟探讨HBV对HOXA10表达的影响及其调节的分子机制。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取上海市浦东新区公利医院临床确诊为慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）的患者20例（CHB组），其中男12例、女8例，年龄（43.5±14.9）岁，诊断符合《慢性乙型肝炎防治指南》（2019年版）[4]。所有患者均排除丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒等其他病毒感染。选取上海市浦东新区公利医院体检中心既往无病史、无肝炎病毒感染史且体检报告无任何异常的健康体检者23名，其中男14名、女9名，年龄（42.7±15.6）岁。本研究经上海市浦东新区公利医院伦理委员会批准，所有对象均签订知情同意书。

1.2 材料

人肝癌细胞系HepG2及HepG2.2.15均购自武汉大学典藏培养物保藏中心。Lipofectamine 2000、TRIzol R、SYBR GreenER qPCR mix和逆转录酶M-MLV均购自美国Invitrogen公司。兔抗人HOXA10单克隆抗体及羊抗兔二抗均购自美国Abcam公司。HBV单个基因（S基因、E基因、C基因、X基因和P基因）的真核表达质粒pCMV-S、pCMV-E、pCMV-C、pCMV-X、pCMV-P及含有HOXA10基因启动子的荧光素酶报告基因pGL3-HOXA10由本实验室自行构建[4]。……