超高效液相色谱法同时测定绿茶茶汤中12种有效成分

胡 毅,王 微,兰吉玉,鄢人雨,刘文锋*

(1.贵州大学,贵阳 550025; 2.黔东南州农产品质量安全检测中心,凯里 556000)

中国是最早种植茶叶的国家,距今有6 000多年的历史[1]。绿茶是中国的主要茶类之一,通过采取茶树的新叶或芽,经杀青、整形、烘干等工艺制作而成。绿茶中含有茶多酚、咖啡碱、氨基酸、多糖等生物活性物质[2],这些成分对防衰老、杀菌、消炎等具有特殊效果[3]。准确测定茶叶茶汤中的有效成分对茶叶品质评价、茶叶加工、茶树选育等方面具有重要意义。

目前,测定茶叶中活性成分的常用方法有液相色谱-串联质谱法[4]、高效液相色谱法[5]、毛细管电泳法[6]和分光光度法[7]等。其中高效液相色谱法因分离效果好、测定结果准确的优点而被广泛应用,但该方法存在分析时间长、结构相似的物质分离度不高等问题。与传统的高效液相色谱法相比,超高效液相色谱法(UHPLC)具有分析快速、分离效果好、灵敏度高等优势[8]。

本工作建立了UHPLC同时测定绿茶茶汤中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、没食子酸(GA)、儿茶素没食子酸酯(CG)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、儿茶素、没食子儿茶素、茶氨酸、咖啡因、可可碱等12种有效成分含量的方法。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

Waters型超高效液相色谱仪;SG 3200 HD型数控超声清洗机;ULTRA-TURRAX型分散机;TG-16-WS型离心机;JY5002型电子天平;DZKW-4型电热恒温水浴锅。

单标准储备溶液:分别称取适量标准品,用水溶解,配制成质量浓度为2.00 g·L－1的单标准储备溶液,于4～8℃保存5 d。使用时,分别移取上述单标准储备溶液,用水稀释,配制成所需质量浓度的单标准溶液。……