中药材鉴定运用分子标记技术的实践探寻

谢 薇

中药为我国中医学必需的治疗方法，在保健、养生、治疗疾病等方面起到不可替代的作用。分子鉴定技术逐渐成为中药鉴定的主要鉴定方法，是通过直接分析遗传物质的多态性以推断物种内遗传变异情况，以实现药材鉴定的方法[1]。本文对分子标记技术分析和总结了该方法的优缺点，并阐述了分子鉴定技术未来发展方向。

1 分子标记技术的分类

分子鉴定技术分为：以mDNA为基础的分子标记技术、基于传统Southern印迹杂交技术的分子标记、以PCR为基础的分子标记技术、以重复序列为基础的分子标记技术、DNA序列分析、DNA条形码技术[2]。

1.1 以RP-PCR为基础的标记技术以RP-PCR为基础具有操作简便、敏感性高、特异性强、高通量等优点，其主要引用在遗传多样性分析和对中药材快速鉴定中，存在的缺点为无法避免基因组DNA、定量准确性弱、并且鉴定的误差较大[3]。

1.2 Southern杂交技术的标记技术主要为RFLP、单链多态性RFLP、变性梯度凝胶电泳-RFLP技术等，具有标记数目无限、大部分标记具有明显性、任何生育期可进行预测、不受到外部环境的影响且存在高度的变异性，多用于中药的多样性分析和品种鉴定分析，存在缺点为准确性较差、容易产生假现象[4]。

1.3 以重复序列为基础的标记技术主要有DNA重复序列应用于ISSR技术，为DNA微基础的分子标记，其原理为用锚定的DNA为引物，在PCR反应中可是锚定引物引起特定位点退火锚定引物互补和不太重复序列的DNA片段，开展PCR扩增，可扩增为多个条通过聚丙烯酞胺凝胶电泳进行分辨，以发生显性反应[5]。……