高丽娜 李艳 韩现芹 张浩
(天津市农业生态环境监测与农产品质量检测中心 300110)
改革开放以来,人民的物质生活水平不断提升,消费者对畜产品质量安全问题的重视程度越来越高,这需要采用更加先进、准确的技术对畜产品中的有毒有害物质进行检测,从而确保畜产品的安全。ELISA 技术的特异性和敏感性都比较高,对可溶性抗原抗体系统的检测较为可靠,也不会产生过度的污染,对工作人员、环境都比较安全,且ELISA 技术是通过抗体分子(酶分子)共价结合的方式实现安全检测,这种结合方式对酶的生物学活性也不会受到干扰。相较于其他费时、费力、费用昂贵的检测方法,ELISA 技术更具有推广价值。
ELISA 技术是以免疫学反应为基础,将抗原抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合的一种具有高特异性、高敏感度的实验技术[1]。具体步骤是将基质中抗原、抗体结合在固相载体的表面,使其保留免疫活性,再加入抗原、抗体与酶结合形成偶联化合物,该偶联化合物不仅有酶的活性特异性,也有与载体表面的抗原、抗体特异性结合的活性,最后加入对应酶的底物,从而出现颜色反应,用分光光度计判定底物的显色结果,进行检测结果的判断。常见的ELISA 类型有7种,分别是双抗体夹心测抗原、双抗原夹心测抗体、间接法测抗体、竞争法测抗体、竞争法测抗原、捕获包被法测抗体以及亲和素-生物素系统-ELISA,其中传染病的检测主要应用间接法测抗体,其优点是只需要更换包被抗原就能够利用同一酶标抗体建立检测相对应的抗体。……