动物疫病采样监测中存在的问题及注意事项

黄金玉，陈永媛

(广西崇左市江州区动物疫病预防控制中心，广西 崇左 532200)

0 引言

针对动物进行的疫病的采样和检测工作不仅可以有效避免动物之间出现疫病的流行，也可以在实际的采样和检测中获得防治疫病的措施和方法。虽然采样和检测工作随着社会的发展而不断提升，但是在实际工作中还是会存在各种问题，在新形势之下，怎样让采样和检测工作得到大幅度的改善和强化，以提升最终的工作效率，是现阶段动物采样和检测工作人员要考虑的首要问题之一。

1 动物疫病监测中存在的问题

1.1 重视动物疫病抗体监测，轻视病原学监测

对动物的疫病进行监测的主要目的就是为对现阶段动物疫病进行风险等级的有效评估，并为动物疫病的防护和控制措施及政策提供必要的数据和信息基础[1]。在这样的工作中，抗体监测仅仅是整体疫病监测的一个组成部分，而对病原学进行监测的意义也是非常重大的，尤其是针对疑似疫病的疾病发生的时候，对病原学进行监测可以起到诊断疫病的作用。但是现阶段的许多动物疫病在监测中都只重视抗体的监测，而不重视病原学的监测。

1.2 流行病学的调查不够

在动物疫病的监测工作中，对动物的流行病学进行深入的调查，可以有效评估相关疫病的发展趋势，并将结果及时的反馈给指导疫病防控政策的相关人员[2]。针对动物的流行病学进行深入的调查是疫病在风险评估上比较重要的内容之一，现阶段虽然许多监测中都已经开展了流行病学的调查工作，但是实际工作的深度并不够，还是有较大的发展空间。

1.3 监测结果利用程度不够

现阶段许多对动物疫病抗体的检测结果，主要就是评估相关疫苗的实际免疫效果，用于指导免疫流程和最终有效诊断疫病的工作还不够深入，未能有效发挥动物疫病监测结果的实际价值和作用。

1.4 基层人员对监测工作的认识不够

针对动物开展的疫病监测工作是最近几年才慢慢得到重视的一项工作。由于开展的时间并不长，许多人对于监测工作的真正作用和意义的认知程度还远远不够，这也阻碍了动物疫病监测工作的顺利开展[3]。

2 动物疫病采样中存在的问题

2.1 采集血样中存在的问题

溶血这一现象，是在实际采血工作中比较容易出现的问题之一。产生这样的问题主要是因为：①采血或排血到容器过程中速度过快造成红细胞破裂。②相关容器放置不稳，产生了容器倒置或者是送样的过程中受到了震荡。③采血的注射器或容器受到了污染。④采血之后没有对样品进行适当温度的保存或者没有及时送到实验室进行保存。⑤抽血困难，采血进针不准，针尖在血管中穿来穿去造成血肿，在血肿的地方采集。另外因为有时实际采血量不足3 mL或者更少，使得被分离出的血清不足量，很难进行检测工作[4]。

2.2 棉拭子采样中存在的问题

在棉拭子的采样中一般都是采用2 mL的离心管来进行保存，但是在实际的保存工作中经常会出现没有在离心管中加入保存液或者离心管的盖子没有拧紧等情况，这样造成的直接后果就是会使离心管中的液体流失造成污染，影响检测结果。

2.3 组织病料采集中存在的问题

在对组织病料进行采集中比较常出现的问题是所采集的组织病料没有一定的代表性，采集的动物因为死亡过久而组织病料不新鲜，所采集的病料受到其他病毒或物质等的污染，所采集的病料体积太大或者太小及许多个病料混在一起存放等。

2.4 采样记录中存在的问题

在实际进行采样之前，部分工作人员并不进行必要的采样前准备工作，在实际采样中不携带采样登记表或者记录不规范、不完整等，也存在并没有按照实际要求对所采集的样品进行编号等情况[5]。

3 动物疫病采样监测中的注意事项

3.1 做好准备工作

1)样品采样的基本原则。在实际进行采集的时候要按从动物的胸腔位置到腹腔位置的顺序进行，先采用无菌的方式采集动物的实质器官，以有效避免组织受到外界的污染，后采集受到污染的组织，如动物的胃肠和粪便等[6]。实际所采集到的病料必须具有一定的代表性，且在一些病变比较明显的位置采集的组织和器官。采集病料的种类，要根据动物所患有的不同的疾病或者实际检查的目的来进行采集；病料的采集也应该在动物没有使用任何的药物之前进行，以免受到药物的干扰。针对一些死亡的动物，其内脏病料的采取最好不要超过6 h，否则会因为天气变化导致组织腐败进而产生不合格的病料。

2)采样前的准备。在实际进行样品的采集之前，要做好需要的器械和记录用品、样品保存液和相关防护用品的准备工作。

3.2 血样采集的注意事项

3.2.1 注意采血的目的与用途

在实际进行实验血清的制备的时候，一般情况之下是要使用一次性的不含抗凝剂的真空采血管来进行采血。在实际制备血浆的时候，应用含有抗凝剂的采血管，在采血工作完成之后，相关工作人员要让血管尽量多摇晃几次，以使得其中的抗凝剂可以和血液均匀地混合在一起[7]。

3.2.2 掌握好采血时间和免疫间隔时间

在对动物进行血液采集的过程中，用于免疫抗体监测的血样采集应该注意各种疫苗在免疫之后的抗体的产生时间。例如禽流感和口蹄疫一类的疾病，一般都要在免疫的21 d之后再进行采血，致病率比较高的猪蓝耳病则需要在免疫的28 d之后进行采血。这里还需要注意的是在实际进行采血之前要让被采动物在实际采血之前禁食8 h左右。

3.2.3 注意采集血样的部位

不同种类的动物采血方式上也是不一样的。鸡鸭类要采集其心脏或者翅膀下的静脉血；而牛羊类则要采集其颈静脉中的血液；猪则需要采集耳尖静脉血或者前腔中的窦静脉血。

3.2.4 注意样品的标记和采样记录的规范性

在采血工作结束之后，相关工作人员要马上在血液储存管子上做好相关标记，并在采样的登记表中标明相关样品的序号、采血管编号等信息。这里需要注意的是，相关信息必须要保持实物和登记表中的信息一一对应。采样的登记表中的全部内容应由相关工作人员填写完整，在送样之前要留下一份以备自查。

3.3 采集棉拭子应注意的事项

针对一些致病率比较高的疾病，例如高致病性禽流感H7N9等进行棉拭子采集的时候，要采集家禽咽喉部位和泄殖腔2个位置[8]。在实际采集中，应使用无菌的棉签，插入鸡喉头的位置和泄殖腔位置转动3圈再取出，并将该棉签插入离心管中且要弃掉多余的部分进行保存。切记拧紧瓶盖、做好相关标记，密封保存；针对猪的棉拭子，咽部拭子、肛门部位的拭子在采集中都要使用无菌的棉签进行相关位置分泌物的采集。在棉拭子的保存工作中，要在密封且低温的条件下保存，其中比较常用的保存液是加有0.8～1 mL的PBS液(含有抗生素)。

3.4 组织病料的采样

在进行动物内脏的组织采集时，如果动物已经死亡则要尽快进行。如果采集时间是在夏天，那么最好不要超过2 h，冬天则可以不超过6 h。在实际采集的时候要尽可能地保证动物的病料不受到外界污染。实际采集的组织病料不用太大但也不能太小，最佳的大小要在1～2 cm。采集以后的样本要放在经过消毒的密闭容器之中。如果所采集的样本是要进行病理检查，则需要采集一些病变部位和健康部位交接的位置，切记不要让组织块受到挤压或者水洗。如果用作冷冻和切片的话，则需要将组织块放置在0℃～4℃的消毒容器之中并将其在最短的时间之内送到实验室中进行检测。

3.5 样品的保存和送样应注意的事项

如果采集现场没有条件对所采集的血液样品进行血清分离工作，应该对其进行冷藏保存。进行冷藏保存，必须要在48 h之内将样品送进冷藏室中，以保证血清可以得到低温的保存；相关棉拭子和组织的病料在采集后要马上送到冷藏箱中或者实验室中进行保存或者检测。如果不能马上进行检测，则应对其进行低温的保存。

4 结语

动物疫病的采样和监测工作相对来讲是比较复杂的，所以在每一个工作环节中都需要仔细，都要严格按照相关注意事项开展。动物疫病采样监测工作的正确进行，不仅有利于动物疫病的检测，防止疫病传染，也可以有效促进畜牧业的稳定发展。