高原鳅属鱼类线粒体DNA 和微卫星标记开发研究进展

刘云国，张艳珍,2，隋智海，张海光，全先庆，张如华

（1.临沂大学生命科学学院，山东 临沂 276000;2.新疆大学生命科学与技术学院，新疆 乌鲁木齐 830046）

高原鳅属Triplophysa 隶属于鲤形目Cyprinidformes、鳅科Cobitidae、条鳅亚科Nemacheilinae，是条鳅亚科中最大的类群，也是条鳅亚科鱼类中适应于高原高寒环境的一个特殊类群[1,2]。近十几年来，在我国相继发现了许多高原鳅属鱼类[3-12]，目前全世界约有140 个种，主要分布于青藏高原及其周边地区，我国有100 多个种，其中一些种的遗传多样性正遭受威胁[7,13-15]。DNA 分子标记是评价遗传多样性以及资源保护的有力工具。在众多DNA 分子标记中，目前较常用的两种是线粒体DNA（mtDNA）测序技术和微卫星标记。线粒体DNA 是细胞核外能自主复制、转录及翻译的遗传因子。鱼类线粒体DNA 结构简单、分子量小、拷贝数高、进化速度快且存在种群差异多样性、易于扩增测序，为研究系统发育、分子进化和物种起源的重要分子标记。微卫星标记是均匀分布于真核生物基因组中的简单重复序列，由2～6 个核苷酸的串联重复片段构成。重复单位的重复次数在个体间呈高度变异性且数量丰富，因此微卫星标记应用非常广泛[16]。

1 高原鳅属鱼类线粒体基因测序及其应用

高原鳅属鱼类的线粒体基因组全长16～17 kb，包括13 个蛋白质编码基因，22 个tRNA，2 个rRNA，1 个非编码区域，即控制区（D-loop 区），高原鳅属鱼类的控制区长度范围在917～930 bp 之间。斯氏高原鳅T.stoliczkae[17,18]、细尾高原鳅T.stenura[19]、叶尔羌高原鳅T.yarkandensis[20,21]、玫瑰高原鳅T.rosa[22]和理县高原鳅T.lixianensis[23]等的线粒体基因组的测序已经完成。李太平等[24,25]对小眼高原鳅T.microps线粒体DNA 进行了酶切分析，并克隆了其细胞色素b（cytb）基因序列的全长，研究了其遗传多样性。……