基于星形胶质细胞条件培养基的OPC制备技术探索

杨 莹，许雯铱,2，李聪慧,2，杨俊林,2

(1. 杭州师范大学生命与环境科学学院，浙江 杭州 311121； 2. 浙江省器官发育与再生技术研究重点实验室，浙江 杭州 311121)

少突胶质细胞(oligodendrocyte，OL)是中枢神经系统中包裹轴突形成髓鞘的大胶质细胞，它们负责产生髓鞘，并且在保持轴突完整性以及电脉冲沿轴突快速有效传导等方面发挥至关重要的作用.少突胶质细胞由少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells，OPCs)分化成熟而来[1].OPCs是一种潜在的干细胞，能分化成为少突胶质细胞，进而促进中枢神经系统髓鞘的形成[2].同时，OPCs是脱髓鞘病变中髓鞘再生的主要种子细胞[3]，因此，它们除了被广泛用于脱髓鞘疾病致病机理的研究之外，在移植治疗脱髓鞘疾病方面也具有广阔的应用前景[4].此外，OPCs在发育过程中参与维持血脑屏障的完整性，其移植可以减少血脑屏障的渗漏，是治疗缺血性脑卒中的新途径[5].OPCs移植到受损的中枢神经系统中还可以治疗脊髓损伤[6].目前，小鼠OPCs主要通过培养小鼠大脑皮层组织获得[7]，但是所获OPCs的数量和质量依赖于培养时所使用的胎牛血清，即使同一品牌的血清也存在批次间的差异，常常使得OPC的制备充满不确定性[4]，导致小鼠OPC的制备充满挑战性[8].鉴于星形胶质细胞在发育过程中能够分泌一些生长因子来促进OPCs的存活和增殖[7]，如PDGFaa、bFGF、EGF等，本研究拟利用这一特点，探索建立一种比较稳定的OPC制备体系，以满足对OPCs日益增长的需要.

1 材料和方法

1.1 材料

ICR新生小鼠(P0)；D/F20S培养基(79% DMEM/F-12培养基；20%胎牛血清；1% Penicillin-Streptomycin(双抗))；星形……