联合应用线粒体SNP和线粒体DNA高变区测序排除同一母系鉴定1例

钱雪松

上海东南鉴定科学研究所，上海 200051

1 案 例

1.1 简要案情

因申报户口需要，养父母携养女来本所，要求对养父母与养女之间是否存在亲生血缘关系进行鉴定。鉴于养父母各有一个姐姐，还要求对养父母与养女是否来源于同一母系进行鉴定。

1.2 常染色体STR检验

提取养父母与养女的血样DNA，应用MicroreaderTM21（Direct）ID System（北京阅微基因技术股份有限公司）进行PCR 复合扩增，扩增产物经3500xL 基因分析仪（美国Applied Biosystems 公司）电泳分离和激光扫描分析，用GeneMapperTMID-X软件（美国Applied Biosystems 公司）分析，得到3 份血样的分型结果。结果表明，养女在D19S433、D18S51、D6S1043等多个基因座的等位基因不能从养父母的基因型中找到来源，父女、母女的累积亲权指数均小于1/10 000。

1.3 线粒体SNP检验

取适量上述血样DNA，应用Expressmarker mtDNASNP60荧光检测试剂盒（无锡中德美联生物技术有限公司）进行PCR 复合扩增，扩增产物经3500xL 基因分析仪电泳分离和激光扫描分析，用GeneMapperTMIDX软件分析，得到上述检材的分型结果。结果（表1）表明，养父与养女在检测的60 个SNP 位点上有14 个SNP 位点分型结果不同，可以排除养父的姐姐为养女的生物学母亲。养母与养女在检测的60 个SNP 位点上分型结果均相同，无法排除养母的姐姐为养女的生物学母亲。

表1 线粒体SNP的检验结果Tab.1 Test results of mitochondrial SNP

1.4 线粒体DNA高变区序列检验

取适量上述血样DNA，用引物L16047/H16464和L29/H408 对线粒体DNA 高变区Ⅰ和高变区Ⅱ进行PCR 扩增，扩增产物经3500xL 基因分析仪电泳分离和激光扫描分析，并与Anderson 标准序列进行比对，得到上述血样的线粒体DNA 序列特征。结果（表2）表明，养父与养女、养母与养女在线粒体DNA 高变区Ⅰ和高变区Ⅱ的序列特征不一致，在排除养父的姐姐为养女生物学母亲的基础上进一步排除了养母的姐姐为养女的生物学母亲。……