P-糖蛋白的核酸适配体筛选及应用研究

李玉娟， 梁敏， 武广霞， 孙欣欣， 刘珊， 邓玉林

(北京理工大学 生命学院，北京 100081)

P-糖蛋白是最早由LING等[1]在中国仓鼠的卵巢细胞中发现的一种跨膜蛋白，分子量为170 kd，由人类基因mdr1编码[2]，可通过消耗ATP的能量将胞内物质转运至胞外[3]，也是迄今研究最多的三磷酸腺苷结合盒转运蛋白之一[4]. P-gp在人体中广泛分布在肝脏、肾脏[5]、胎盘、小肠及血脑屏障[6-7]等器官及组织中，可以防止有害物质进入，维持内环境的稳态，因而也会影响治疗药物穿越屏障到达靶点发挥疗效，如治疗一些神经系统疾病如癫痫、抑郁症、阿尔兹海默症等的药物[8]. 此外，P-gp在许多肿瘤组织中高表达，能将抗肿瘤药物如长春新碱、紫杉醇、阿霉素等排到肿瘤细胞外[9]，严重影响抗肿瘤药物的治疗效果，由P-gp介导的肿瘤细胞多药耐药的机制，是抗肿瘤领域的研究热点. 研究学者多年来一直致力于开发新型P-gp抑制剂，但大多数P-gp抑制剂因其毒副作用高、特异性低等缺点，限制了其在临床的应用[10]. 因此，迫切需要开发新型安全、高效的P-gp抑制剂.

核酸适配体(Apt)是利用指数富集配体的系统进化(SELEX)技术，从随机寡核苷酸文库中体外筛选的，能与特定靶标结合的ssDNA或RNA，其靶标可以是小分子、蛋白或细胞[11-12]，Apt以高亲和力、强特异性与靶标结合. Apt因为易于合成与修饰，生产成本低，已作为工具分子在生物分析检测领域广泛应用[13-15]. 此外，Apt也可作为治疗药物，如Macugen用于老年黄斑病变，还有很多抗肿瘤用的Apt已进入Ⅱ、Ⅲ期临床研究[16]. 目前尚未见……