寒兰CONSTANS-LIKE基因表达水平及光周期响应分析

应震，周庄，杨燕萍，付双彬，徐碗

(浙江亚热带作物研究所，浙江 温州 325000)

寒兰(CymbidiumkanranMakino)植株修长优美，花色丰富，香味清醇，具有极高的观赏价值、经济价值和文化价值，为五大国兰之一，广泛分布于我国东部、南部及日本和朝鲜半岛，在东亚具有悠久的栽培历史和广泛的种植基础。通过实地调查发现，在浙江地区，寒兰无论种植于室内还是室外，其花期主要集中于10—12月，偶有寒兰会于春季和夏季开花，花期总体上具有一定的周期性。

随着分子生物学研究的发展，植物光周期调控开花的分子机理在拟南芥上逐渐揭示，叶片COL基因对光周期响应是植物光周期开花的根本原因[1]。通过深入研究，以COL和FT基因为核心调控元件的光周期调控的开花模型已经在很多植物开花研究中得到了验证[2]。在蒺藜[3]、菊花[4]、李子[5]、山茶[6]和棉花[7]等植物中已克隆得到对应的FT和COL基因及其同源基因。研究发现，在模式植物中过量表达FT基因可以明显缩短植物花期；而过量表达COL基因可以明显上调FT基因的表达水平，同样起到缩短花期的功能。

寒兰作为五大国兰之一，花期与大多数兰花存在不同，本文拟通过对寒兰开花的统计分析以及利用已报道的兰属、石斛属[8]和蝴蝶兰属[9]COL基因家族信息，对寒兰COL基因在花期前后表达水平进行分析，拟为下一步开展光周期调控寒兰的开花系统研究打下基础。

1 材料与方法

1.1 材料及采样

寒兰种植于浙江亚热带作物研究所温室大棚中，定期浇水培养，选择生长健壮的植株进行实验，实验开展时间为5—11月，每第一个月第一周，采集10盆寒兰叶片，叶片采集并液氮处理后超低温冰箱保存。……