肿瘤坏死因子-α通过Wnt通路对脑卒中小鼠缺血再灌注后脑微血管内皮细胞的影响研究

曹杰，曾辉，黄旭华

1.赣南医学院第一附属医院，江西 赣州 341000；2.南康区第一人民医院，江西 赣州 341400

脑卒中是由于脑内血管破裂或者阻塞引起的局部大脑血液供应不足，脑组织发生病变坏死的一种脑部疾病，其中大部分为缺血性脑卒中［1］。脑卒中发病人数多，有较高的死亡率和复发率。脑卒中对人机体损伤极大，每年患者不断增多。但治疗方式还十分缺乏，主要还是以预防为主［2］。近年来，抑制缺血再灌注导致的血脑屏障损伤已成为治疗脑卒中的新思路［3］，但近几年来未见相关文献报道。探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对脑卒中小鼠缺血再灌注后脑微血管内皮细胞的影响的机制，对脑卒中的治疗有一定帮助。

1 材料与方法

1.1 实验材料

SPF 级C57BL 小鼠80 只，6 周龄，体质量范围20～25 g，雌雄各半，购自武汉万千佳兴公司。饲养环境为（1）符合国标的生活环境；（2）符合国标的饲料；（3）无致病菌或无菌的饮用水。ELISA试剂检测盒（上海酶联生物科技有限公司）；Evans blue 染色剂（上海跃腾生物技术有限公司）；RTPCR 试剂盒（赛默飞世尔科技有限公司）；显微镜。

1.2 实验方法

小鼠随机分为A 组（缺血0 min）、B 组（缺血时间30 min）、C 组（缺血时间45 min）、D 组（缺血时间60 min）。除A 组外小鼠利用线栓法［4］构建缺血再灌注小鼠模型。首先，刮掉小鼠颈部的毛，切开皮肤，分离周围组织使左侧颈总动脉显露，结扎左侧颈总动脉和颈外动脉近心端，插线栓入颈内动脉主干，缓缓推进，血流读数骤降停止推进，固定栓线。缺血时间到达之后，立即取出线栓，苏醒后根据Longas 评分标准［5］进行评分，1～3 分的小鼠纳入实验。……