湖北白猪精原干细胞分离培养及初步鉴定

张立苹，华再东，肖红卫，任红艳，朱 喆，毕延震

（湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室，武汉430064）

精原干细胞（spermatogonial stem cells，SSCs）是一类位于雄性哺乳动物睾丸生精小管基膜上、具有自我更新与定向分化能力并能够产生精母细胞的成体干细胞，也是雄性动物体内惟一能够将自身遗传物质传递给下一代的干细胞，是生成精子的基础细胞［1］。因此，通过SSCs的体外培养和细胞移植，可为繁育优良动物个体、生产基因修饰动物、治疗雄性不育和人类某些遗传疾病提供新思路和新方法［2］。而通过对哺乳动物精原干细胞的诱导分化得到的功能性精子，是解决人类生殖问题的安全、有效的途径，且对精子发生过程、精原干细胞自我更新与分化、生产基因修饰动物等方面的研究具有重要的科学研究意义［3］。

SSCs的体外分离、细胞纯化和鉴定是开展其生物学特性研究、诱导分化及在基因编辑动物制备和种质资源保存上应用的关键和首要步骤，优化精原干细胞分离纯化技术和鉴定方法，建立高效、便捷的精原干细胞体外培养体系，有助于精原干细胞生物学特性和增殖分化机制的进一步研究以及精原干细胞在基因编辑动物制备方面的应用［4］。Kanatsu-Shinohara等［5］首次成功将小鼠精原干细胞诱导为多潜能干细胞。近年来，随着小鼠精原干细胞体外分离培养技术的不断改进，基本能富集到大量细胞，促进了SSCs诱导多能干细胞和体外诱导精子的研究。……