刘雷,施民新,陆海敏,王伟
目前,非小细胞肺癌的治疗方法不断取得进步,但非小细胞肺癌的疗效依然不理想。术后复发和转移是引起非小细胞肺癌疗效不佳的主要原因。非小细胞肺癌的复发和转移除了与临床病理分期相关外,还涉及多种基因的变化。
在前期研究中,本课题组挖掘出一个在非小细胞肺癌中高表达并对预后判断有指导意义的基因非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2 靶蛋白(TPX2)。TPX2是一个与中心体密切相关的蛋白,在肿瘤细胞染色体20q 经常出现基因的扩增。此外,TPX2 也是一个微管相关蛋白,主要在细胞着丝粒处负责微管的组装和形成。既往研究发现TPX2 在肾母细胞瘤和胃癌组织中均呈高表达水平,其过表达常提示预后不良。TPX2 可以通过激活Akt 信号通路进而促进胶质瘤细胞的增殖和迁移。鉴于TPX2基因作为一种促癌基因,其在非小细胞肺癌中高表达,且与病人预后密切相关。然而,其在非小细胞肺癌中的生物学功能还未详细阐明。因此,本研究于2018年10月至2019年8月通过抑制TPX2 表达,观察其对非小细胞肺癌细胞的迁移侵袭性及可能相互作用蛋白之间的影响,以明确TPX2 在非小细胞肺癌发展过程中的生物学功能及可能的分子机制。
1.1 材料
RPMI 1640 培养液及新生牛血清购自杭州吉诺生物医药有限公司。蛋白裂解提取试剂和BCA 蛋白浓度测定试剂盒购自美国Pierce 公司。逆录试剂盒和Gotaq 酶购自美国promega 公司。Trizol试剂、Lipofectamin 3000脂质体转染试剂、人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)试剂盒购自美国invitrigen 公司。……