鲟感染海豚链球菌组织病理学研究

文/王静波 徐立蒲 刘建男 张文 吕晓楠 王小亮 曹欢 王姝

鲟鱼是一种经济价值很高的大型冷水经济鱼类。近年来，鲟鱼养殖业发展迅速，各种病害尤其是细菌性疾病日益严重，制约了鲟鱼养殖业的健康发展。链球菌是一种条件性人畜共患病病原菌，可引起局部组织蜂窝织炎、心内膜炎及化脓性脑膜炎等。其中，海豚链球菌可感染多种海淡水鱼类，引起鱼类的脑膜炎和败血症。目前已有多例海豚链球菌感染西伯利亚鲟、施氏鲟和杂交鲟等引起暴发性疾病的报道，海豚链球菌已成为鲟鱼养殖业的重要威胁。为此，有必要开展鲟鱼感染海豚链球菌后的病理损伤特征研究，探索海豚链球菌对鲟鱼的致病机制，为鲟鱼链球菌病的准确诊断和防治措施研究奠定基础。

一、病原菌的鉴定与组织病理切片制作

（一）患病鲟

采自河北保定某鲟鱼养殖场。

（二）病原分离与鉴定

取症状典型的患病鲟，无菌操作从肝、脾和肾划线分离，于脑心浸液琼脂（BHIA）平板和哥伦比亚血琼脂培养基，于28℃恒温培养箱培养20h。

病原菌鉴定采用API鉴定系统和16S rDNA分子生物学方法。

（三）主要试剂和设备

脑心浸液琼脂培养基、革兰氏染色试剂盒、哥伦比亚血琼脂培养基、API 20 STREP鉴定试剂条、UNIQ-10柱式细菌基因组抽提试剂盒、PCR相关试剂；试验试剂酸性分化液、二甲苯、无水乙醇、切片石蜡、树胶、苏木精、伊红染液等；全自动脱水机、包埋机、冷冻机、切片机、烘片机。

（四）组织病理切片制作与观察

取患病鱼肝、脑、心、鳃、肾、脾和肌肉等组织于10%中性福尔马林中固定。……