应用ISSR 分子标记绘制黔西南州梨品种DNA 的指纹图谱

桂腾琴,李春艳，秦 燕,韦 燕，王颖娟

(1.兴义民族师范学院生物与化学学院，贵州 兴义 562400；2.贵州省民族药用生物资源研究与开发重点实验室，贵州 兴义 562400)

Potter等[1]研究蔷薇科系统发育与分类认为，梨属蔷薇科(Rosaceae)苹果亚族(Malinae)植物。据统计，全世界梨属植物大约有35种，原产于中国的大约有13种[2]。贵州地方梨品种资源丰富，包括砂梨(P.pyrifoliaNakai)、杜梨(P.betulaefoliaBge.)、豆梨(P.calleryanaDcne.)、麻梨(P.serrulataRehd.)等种类，砂梨为主要栽培食用的种质[3]。黔西南部分梨品种的叶形、花色、果型等极为接近，对品种的鉴定存在一定难度。

DNA指纹图谱在品种鉴定等方面有许多优点[4]，如能鉴定品种遗传相似性而且还能鉴定遗传差异等[5-6]。近年来AFLP、ISSR、SRAP等多种新型标记技术广泛地应用于动物、植物中[7-9]。汪斌等[10]运用软件绘制出82个红麻种质资源DNA指纹图谱。李志良等[11]利用ISSR分子标记构建了32个杜鹃花品种DNA指纹图谱。这些研究结果表明，ISSR技术稳定性、重复性比较好，已广泛用于杜鹃、黄麻、红麻、小菊等DNA指纹图谱绘制。关于梨品种分子标记研究主要集中在RAPD分析、SSR分析、AFLP分析等[12-14]，有关黔西南梨品种DNA指纹图谱构建还未见报道，梨品种分子水平的鉴定缺少相应依据。本试验利用ISSR分子标记构建黔西南梨品种DNA指纹图谱，为黔西南地方梨资源有效保护、鉴定、评价利用及遗传多样性研究提供借鉴。

注：M为2 000 bp DNA marker；1～24为梨品种，图中的数字与表1中的品种编号一致。下同。图1 ISSR引物UBC 825在黔西南州24个梨品种中的扩增图谱Fig.1 Amplification of ISSR primer UBC 825 in 24 pear varieties in Qianxinan perfecture

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验在贵州省民族药用生物资源研究与开发重点实验室进行。……