基于LC-MS/MS分析不同蛋白酶酶解奶牛胎盘产物差异及其抗氧化活性预测

张 钺 尤留超 朱颍琨 莘 余 吕尚揆 裴淼毓 傅宏庆 沈留红*

(1.四川农业大学 动物医学院/动物疫病与人类健康四川省重点实验室/奶牛疾病研究中心，成都 611130；2.江苏农牧科技职业学院，江苏 泰州 225300)

奶牛胎盘是奶牛养殖中的副产物，未得到有效利用，且处理不当易造成环境污染和生物安全风险。而胎盘含大量肽类、多糖类、激素、脂质和矿物质等生物活性物质[1]，多肽类物质可能是其主要活性成分，具有促免疫、抗氧化、促进组织恢复和抗肿瘤等作用[2-4]。因此，从奶牛胎盘中提取活性多肽成分有利于新型肽类药物开发，进而促进奶牛胎盘合理利用，减少因胎盘丢弃造成环境污染。

目前从动植物成分中制备活性多肽的方法主要有直接分离法、超声波破碎法和酶解法等。直接分离法要求严格、成本高，常用于确定的单个或几个多肽研究[5]，无法对大量多肽样本进行筛选；超声破碎法操作简便、省时省力、提取率高[6]，但其主要提取胎盘组织中可溶性蛋白和多肽，无法提取组织中不溶性蛋白，而胎盘不溶性蛋白质亦可产生具有生物活性的多肽；而酶解法是制备成分种类单一、作用方式较为确定的胎盘生物活性多肽有效方法，具有条件温和、过程可控、成本较低等优点[7]，能够将不溶性蛋白酶解为小和分子量易于吸收的多肽，更利于对其活性成分研究。目前酶解动植物组织制备多肽的酶有胰蛋白酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶等[8]，不同蛋白酶酶解产物生物活性存在差异[9]。……