赵 丹,安 杰,刘 倩,李 力,朱清华
子痫前期又称为先兆子痫,指妊娠期出现血压升高和尿蛋白增加,如果在轻度子痫前期病情控制不理想,就会发展成为重度子痫前期,出现肝脏损伤、心力衰竭、胎儿发育受限、肾功能异常等[1-3]。子痫前期的发生可能与母体、胎盘、胎儿等多种因素具有相关性[4]。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度>200 nt的非编码RNA,在表观遗传学、转录调控及转录后调控方面发挥重要作用[5]。有研究表明,lncRNA可能参与子痫前期的发生和发展[6]。本研究探讨lncRNA RPAIN在子痫前期患者胎盘组织中的表达及对滋养细胞增殖和侵袭的影响及相关机制。
1.1材料
1.1.1主要试剂:胎盘滋养细胞株HTR-8/SVneo购自中科院上海细胞库;胎牛血清、PRIM1640培养基购自美国Hyclone公司;MTT试剂购自北京索莱宝生物科技有限公司;Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒购自赛默飞世尔科技有限公司;PCR引物购自上海生工生物工程有限公司;Transwell小室购自美国Corning公司;Matrigel胶购自美国BD公司;BCA蛋白测定试剂盒购自上海碧云天生物科技有限公司;Wnt/β-catenin信号通路特异性抑制剂ICG001购自美国Selleck公司;基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Wnt5a、β-catenin、血管内皮生长因子(VEGF)和β-actin单克隆抗体及辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔二抗均购自北京中杉金桥生物科技有限公司;si-NC、si-RPAIN购自广州市锐博生物科技有限公司。
1.1.2组织标本:选取2018年8月—2019年12月在我院剖宫产分娩的30例子痫前期作为试验组,排除多胎及生殖器官畸形,妊娠期糖尿病、原发高血压病、慢性肾炎等。同期选取30例剖宫产分娩的正常妊娠孕妇作为对照组。试……