lncRNA GAS5调控Notch通路对骨髓间充质干细胞软骨分化的影响

王勇超，粟钦，林昕，田强，傅美淳，张克云

湖南医药学院第一附属医院关节运动医学科，湖南怀化418000

关节软骨缺损是一种由多种因素造成的关节透明软骨缺损，会导致关节僵硬、疼痛，加速关节退变，由于关节软骨缺乏血管及淋巴，其自我修复能力极其有限。传统骨髓刺激疗法对关节软骨缺损的治疗效果较差，目前以骨髓间充质干细胞（BMSCs）为基础的软骨组织工程已被认为是治疗软骨缺损的一种有效方法［1-2］。BMSCs 是一种具有高度分化能力的多能干细胞，可分化为软骨细胞、成骨细胞，用以修复缺损组织［3］。因此，有效促进BMSCs 软骨分化对关节软骨缺损患者的治疗极其重要。近年来，长链非编码RNA（lncRNA）在调节BMSCs 软骨分化中的作用逐渐得到关注［4］。研究发现，lncRNA 生长停滞特异性转录本5（GAS5）参与了骨关节炎等软骨损伤疾病的发生，其高表达可促进BMSCs 的成骨分化，延缓骨骼疾病进展，但目前关于其对BMSCs 软骨分化的影响鲜见报道［6］。Notch 通路在间充质干细胞（MSCs）的维持及细胞增殖过程中具有重要作用，抑制其激活可显著促进MSCs 的软骨分化［7］。研究显示，Notch 通路在关节软骨损伤患者的软骨组织中被显著激活［7］。目前关于 lncRNA GAS5 是否可能通过调控Notch 通路而影响BMSCs 软骨分化尚不明确，为此我们于 2020 年 1 月—2021 年 2 月进行了如下研究，为研究BMSCs 软骨分化的发生机制提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 雄性SD 大鼠5 只，7 周龄，体质量200～255 g，均购自扬州大学；在明暗交替12 h/12 h 环境中适应性饲养7 d，许可证号：SCXK（苏）2017-0007。

1.1.2 主要试剂 Notch 信号通路特异性阻断剂2，4-二氨基-5-苯噻唑（DAPT，30050619）购自深圳海思安生物技术有限公司；……