硫利达嗪协同二甲双胍对肺癌细胞的抑制作用及其机制*

王 芳，刘星吟，王攀琦，刘 洋，刘复兴，宁志丰**

(1.湖北科技学院药学院，湖北 咸宁 437100；2.湖北科技学院基础医学院)

肺癌分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌， 非小细胞肺癌又分为肺鳞癌和肺腺癌。肺癌的发病率在各类癌症中位居第二，死亡率在所有类型的癌症中遥遥领先[1]。目前，肺癌主要以化疗和放疗为主。但化疗药物易产生耐药性，且对患者伤害较大，因此，寻找新的抗肿瘤药物成为治疗肺癌的研究热点。二甲双胍是治疗2型糖尿病的口服降糖药，Evans等[2]首次发现二甲双胍可以降低糖尿病患者的癌症发病率，此后，二甲双胍的抗癌作用受到广泛关注。研究表明[3-4]，二甲双胍对肺癌、子宫内膜癌等均有抑制作用，具有潜在抗癌价值。硫利达嗪是一种常见的吩噻嗪类抗精神病药物，近年来研究[5-6]发现硫利达嗪对多种癌症如胶质瘤、黑色素瘤等有抑制作用。因此，我们将二甲双胍与硫利达嗪作为新的抗肿瘤药进行研究。

1 材料与方法

1.1 材料

人肺腺癌细胞H1975细胞株为研究模型。主要试剂：盐酸硫利达嗪和盐酸二甲双胍、二甲基亚砜(DMS0)购自美国Sigma公司；四甲基偶氮唑盐(MTT)购自碧云天生物技术研究所；RPMI-1640培养基购自美国 Hyclone公司；胎牛血清(FBS)、青霉素-链霉素购自美国Gibico公司；Matrigel胶购自美国Corning公司；Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K、mTOR、p-mTOR和β-actin抗体购自武汉爱博泰克(ABclonal)生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养

人肺腺癌细胞H1975细胞的培养条件为5%CO2、37℃。配制含10%胎牛血清和1%双抗的RPMI-1640培养基培养细胞，细胞密度达到90%时进行实验。

1.2.2 MTT细胞增殖实验

将消化后的H1975细胞调整细胞密度至7×104个/mL，96孔板每孔加入100μL的细胞悬液，放置培养箱内培养。……