海兰褐蛋鸡ZP3基因结构及其在卵泡中表达规律分析

朱帅鹏，王东雪，刘 聪，孙君卫，杜振伟，孙桂荣，李文婷

(河南农业大学动物科技学院，郑州 450046)

卵透明带蛋白(ZP)是围绕在卵子周围的一层糖蛋白基质[1]，其结构与功能是以几种蛋白之间相互作用为基础[2]。ZP糖蛋白最早是在初级卵泡中合成[3]，被转化酶处理之后分泌到细胞外[4]，在细胞外ZP蛋白受到水解酶切割形成单体(ZP1、ZP2、ZP3和ZP4)，其中ZP3是精子的最初受体[5-6]，它对卵子的生成、精卵结合以及早期胚胎发育都具有重要的作用[7]。ZP3与精子蛋白受体结合引发顶体反应[8]，促进精卵结合从而完成受精[9]，除此之外ZP3还参与阻止多精入卵，有助于子宫内受精卵的贴附[10]。

ZP3可以与ZP1、ZP2、ZP4分别结合形成3种二聚体[11]，构成ZP蛋白的结构框架，缺乏ZP1蛋白的卵母细胞不能形成正常的ZP组织[12]，缺乏ZP3的雌性小鼠不能形成ZP蛋白[13]，ZP3的突变会使其与ZP2之间作用机制受到影响，会导致女性空卵泡综合征[14]进而引起人类不育[15]，同时有研究证实，ZP3变异与绵羊[16]、猪等的产羔数、产仔数显著相关。在小鼠中敲除ZP3后不能形成卵透明带蛋白[17]，研究者们因此认为，ZP3蛋白可能是免疫不育的潜在靶抗原[18]。

目前有多种动物的ZP3 cDNA序列得到扩增，如褐家鼠、草原兔尾鼠、牦牛、野猪、欧洲兔等。但关于鸡ZP3基因研究较少，因此，本试验通过对海兰褐蛋鸡ZP3全长克隆，对其编码区序列进行分析和功能结构域预测，并和多种不同物种的编码序列进行比对分析构建基因进化树，为鸡ZP3及其功能的研究提供理论依据。通过构建海兰褐蛋鸡ZP3在不同组织、不同发育阶段卵泡以及不同发育阶段的卵泡颗粒细胞和卵泡膜细胞的表达谱，分析ZP3在鸡卵泡发育过程中的表达特征，为ZP3基因在卵泡发育过程中作用的研究提供基础。……