特异性坏死性凋亡抑制剂-1(Nec-1)减轻脊髓损伤模型大鼠胶质瘢痕的形成

陈 胜，王春明，严雪飞，毛渊青

(南京医科大学附属江苏盛泽医院/南京医科大学康达学院盛泽临床医学院 骨科， 江苏 苏州 215228)

脊髓损伤(spinal cord injury，SCI)可导致机体运动功能和感觉功能丧失，甚至造成死亡，对患者造成极大危害[1]。胶质瘢痕是脊髓损伤后，由星形胶质细胞、小胶质细胞和少突胶质前体细胞形成的一种边界结构，在脊髓损伤后期阻碍神经元轴突的延伸和神经轴索的再生，抑制神经功能恢复。因此，抑制胶质瘢痕的形成，对脊髓损伤的恢复有重要意义。脊髓损伤后细胞会发生程序性死亡，细胞凋亡及自噬相关蛋白显著增加[2]。Cathepsin B是一种半胱氨酸蛋白水解酶，调节细胞死亡和细胞内蛋白质分解代谢。Caspase家族蛋白是细胞凋亡的重要参与者，在局灶性脑梗死中发现cathepsin B可调控caspase-3蛋白酶，扩大细胞凋亡[3]。减少星形胶质细胞的活化，可以抑制瘢痕的形成。特异性坏死性凋亡抑制剂-1(necroptosis inhibitor-1/necrostatin-1,Nec-1)是小分子碱类物质,是程序性坏死的特异性抑制剂，在细胞的死亡和炎性反应中发挥重要作用。本文观察Nec-1对脊髓损伤大鼠模型胶质瘢痕形成的影响，及其抑制瘢痕形成的可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物：SPF级SD雌性大鼠，体质量180～200 g{广州医科大学实验动物中心[许可证号：SYXK(粤)2016-0158]}。进行常规饲养，适应饲养1周后用于研究。本研究遵循《实验动物管理条例》。

1.1.2 主要试剂：Nec-1抗体、caspase-3抗体、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)抗体和波形蛋白(vimentin)抗体(Abcam公司)；cathepsin B抗体(Bioss公司)；辣根过氧化物酶标记(HRP)的山羊抗兔二抗(北京博尔西科技有限公司)；……