辣木叶降脂颗粒对高脂血症小鼠降脂作用探析

陈 鑫，王 云，张永萍，2*，陈 琴

(1.贵州中医药大学，贵州 贵阳 550025；2.贵州省中药民族药炮制与制剂工程技术研究中心，贵州 贵阳 550025)

高脂血症(hyperlipidemia，HLP)主要是指血浆中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)过高和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)过低的一种体内脂代谢异常的临床常见疾病[1-2]，是引起动脉粥样硬化、脂肪肝、高血压、脑卒中等心脑血管疾病的重要危险因素之一。临床常以降脂药，如他汀类、贝特类、烟酸类等药物来预防和治疗高脂血症的发生，该类药物降脂作用明显，但长期使用可导致严重的横纹肌溶解[3]、胃肠道恶心、腹胀和腹泻等不良反应。因此开发副作用小、药效稳定的降脂药成为近几年的研究热点之一，中药预防和治疗脂代谢紊乱有独特的优势，发挥了重要作用[4]。

中药辣木叶[5]、刺梨[6]、黄精[7]、沙棘[8]、马齿苋[9]是独具贵州特色的药食同源药材，均以黄酮和多糖类为主要成分，该类成分具有降血脂血糖、预防动脉粥样硬化、抗氧化、增强免疫力等作用[10-14]。在前期研究中，以这五味药材为原料制成了保健食品辣木叶降脂颗粒，为探讨该药的降脂作用，本试验选用正常小鼠为研究对象，复制蛋黄乳致急性高脂血症模型和高脂饲料致食饵性高脂血症模型来观察辣木叶降脂颗粒的调脂作用，以期为该药食同源保健食品的相关保健功能开发提供相关实验依据。

1 实验材料

1.1 仪器

MULTISKAN酶标仪(北京昊诺斯科技有限公司)；HY-2 涡旋混匀仪(上海迈皋科学仪器有限公司)；RRH-A1000高速功能粉碎机(上海缘沃工贸有限公司)。

1.2 试药

辣木叶降脂颗粒，贵州中医药大学药物制剂实验室自制(制剂批号为20190521)；TG试剂盒(产品批号为20190615)；TC试剂盒(产品批号为20190615)、LDL-C试剂盒(产品批号为201906-15)、HDL-C试剂盒(产品批号为20190615)均购于深圳子科生物科技有限公司；6-丙基-乙-硫代尿嘧啶(产品批号为530643)、胆固醇(产品批号为511040)、胆酸钠(产品批号为530219)均购于上海源叶生物科技有限公司；辛伐他汀片(产品批号为20190203)，成都华宇制药有限公司；基础饲料，长沙市天勤生物技术有限公司；78.8%猪油和白砂糖、新鲜鸡蛋自备。

1.3 实验动物

小鼠，6～8周龄，体质量(20±2)g，雄性，SPF级，动物质量合格证号：1107261911000018，生产许可证号：SCXK(湘)2014-0011，由长沙市天勤生物技术有限公司提供。

2 实验方法

2.1 造模剂制备

①75%蛋黄乳：取新鲜鸡蛋的蛋黄用生理盐水配制成浓度75%的蛋黄乳；②高脂饲料：78.8%基础饲料、3.4%胆固醇、0.2%丙硫、0.5%胆酸钠、9.8%猪油、7.3%蔗糖粉混合，制成颗粒状，80～85 ℃烘箱中放置8 h，即得。分别称取高脂饲料19.2 g、9.6 g、4.8 g溶于20 mL生理盐水中，制得辣木叶降脂颗粒高、中、低剂量(为人体推荐量的60、30、15倍)溶液；③阳性药：取1片辛伐他丁溶于10 mL的生理盐水溶液中，制得1 mg/mL的辛伐他丁溶液。

2.2 动物分组及给药

小鼠适应性喂养1周后，随机分组，观察：①对正常小鼠血脂的影响：将小鼠分正常组、辣木叶降脂颗粒高、中、低剂量组4组，按20 mL·kg-1/d灌胃1次(正常组灌胃等体积蒸馏水)，连续灌胃3 周；②辣木叶降脂颗粒对75%蛋黄乳致急性高脂血症小鼠血脂的影响：将小鼠分为空白组，模型组，辣木叶降脂颗粒高、中、低剂量组以及辛伐他丁组，每组10只。每组按20 mL·kg-1·d-1灌胃给药1次(正常和模型组均灌胃等体积蒸馏水)，在第20天给药5 h后，各组按 20 mL·kg-1腹腔注射75%蛋黄乳(正常组除外)；③辣木叶降脂颗粒对高脂饲料致食饵性高脂血症小鼠血脂的影响：将小鼠分为空白组，模型组，辣木叶降脂颗粒高、中、低剂量组以及辛伐他丁组，每组10只。除正常组之外，每组均1次/d喂食高脂饲料，造模2周后，按20 mL·kg-1·d-1灌胃1次(正常组和模型组灌胃等体积蒸馏水)，连续灌胃3周。

2.3 检测指标

每组大鼠在末次给药后，禁食不禁水12 h，然后眼科弯镊摘眼球取血，离心，取上清液，分离血清，通过ELISA法检测血清中TG、TC、HDL-C、LDL-C的表达，具体步骤按试剂盒标明方法进行。

2.4 统计学分析

3 实验结果

辣木叶降脂颗粒对正常小鼠、蛋黄乳致急性高脂血症小鼠、高脂饲料致食饵性高脂血症小鼠血清TG、TC、LDL-C、HDL-C含量的影响分别见表1、表2、表3。结果显示，将蛋黄乳或高脂饲料造模后，模型组小鼠与空白对照组相比，蛋黄乳造模后模型组小鼠血清中TG、TC、LDL-C水平显著升高，HDL-C水平显著降低(P<0.01)；高脂饲料造模后模型组小鼠TG、TC、LDL-C水平有一定程度升高(P<0.05)，而HDL-C水平显著降低(P<0.01)；表明蛋黄乳致急性高脂血症模型以及食饵性高脂血脂小鼠模型复制成功。

表1 辣木叶降脂颗粒对正常小鼠血清TG、TC、LDL-C、HDL-C的影响

表2 辣木叶降脂颗粒对蛋黄乳致急性高脂血症小鼠血清TG、TC、LDL-C、HDL-C的影响

表3 辣木叶降脂颗粒对食饵性高脂血症小鼠血清 TG、TC、LDL-C、HDL-C 的影响

辣木叶降脂颗粒高剂量对正常小鼠血清中的TG、TC、LDL-C均无明显影响(P>0.05)，而对HLD-C水平的升高有一定影响(P<0.05)；对蛋黄乳致急性高脂血症小鼠能一定程度降低其血清 TG 水平(P<0.05)，对 TC、LDL-C、HDL-C 水平无明显影响(P>0.05)；对食饵性高脂血症小鼠，能一定程度降低其血清中的TG、TC、LDL-C水平(P<0.05)，但对HDL-C水平的升高无明显影响。辣木叶降脂颗粒中剂量对正常小鼠血清中的TG、TC、LDL-C、HLD-C 水平均无明显影响(P>0.05)；对蛋黄乳致急性高脂血症小鼠，能一定程度降低其血清 TG 水平(P<0.05)，对 TC、LDL-C、HDL-C 水平无明显影响(P>0.05)；对食饵性高脂血症小鼠，能显著降低其血清TG、LDL-C水平(P<0.01)，对 TC、HDL-C 水平无明显影响(P>0.05)。辣木叶降脂颗粒低剂量对正常小鼠血清和蛋黄乳致急性高脂血症小鼠、食饵性高脂血症小鼠中的TG、TC、LDL-C、HLD-C 水平均无明显影响(P>0.05)。辛伐他汀组对蛋黄乳致急性高脂血症小鼠血清中HDL-C水平的影响明显高于模型组(P<0.01)，但对TG、TC、LDLC水平无明显影响(P>0.05)。辛伐他汀可一定程度降低食饵性高脂血症小鼠血清TG、TC、LDL-C 水平(P<0.05)，但对升高血清HDL-C水平无明显作用(P>0.05)。

4 结语

通过腹腔注射75%蛋黄乳和喂食高脂饲料建立两种高脂血症小鼠模型，通过检测血液生化指标发现，模型组与正常组相比，血清TG、TC、LDL-C、HDL-C水平均存在一定差异(P<0.05)，说明两种高脂血症模型均复制成功。动脉粥样硬化的发病率能随着血清中TG、TC、LDL-C值升高和 HDL-C值降低而增加，降低血脂，可延缓动脉粥样硬化的发生[15]。采用建立高脂血症模型的方法研究辣木叶降脂颗粒调节血脂的功效，并和降脂药辛伐他汀进行比较，结果表明辣木叶降脂颗粒能升高正常小鼠血清HDL-C值，抑制急性高脂血症小鼠血清TG水平，同时可降低食饵性高脂血症小鼠血清TG、TC和 LDL-C值，辣木叶降脂颗粒的这种降脂作用能降低外围组织细胞中胆固醇的堆积，预防动脉粥样硬化。辛伐他汀属于羟甲戊二酰辅酶A还原酶抑制剂，主要通过降低细胞内胆固醇合成水平来降低血脂[16]，从本实验结果可知，辣木叶降脂颗粒的降脂作用与辛伐他汀作用相似，本研究为辣木叶降脂作用机理研究提供了方向。

将正常动物用于降脂药物的初步筛选，如果结果为阳性则表示可靠，若为阴性也不能完全否认药物的作用。辣木叶降脂颗粒能使正常小鼠血清HDL-C水平一定程度升高(P<0.05)，表明辣木叶降脂颗粒可能具有预防高脂血症的功效，为其保健品的研发提供了依据。本研究在，辣木叶降脂颗粒高、中、低剂量组的75%蛋黄乳致急性高脂血症模型小鼠血清TG水平有一定程度降低(P<0.05)。在辣木叶降脂颗粒对高脂饲料致食饵性高脂血症模型小鼠血脂的影响方面，高剂量可降低高脂血症小鼠血清TG、TG、LDL-C水平(P<0.05)，中剂量可降低血清TG、LDL-C水平(P<0.05)，低剂量对TG、TG、LDL-C水平也有降低作用，但降低效果不明显；本研究中，高、中、低剂量组血清的HDL-C表达均有升高，但作用不显著。

综上所述，辣木叶降脂颗粒能够改善高脂血症小鼠血脂水平，从而预防高脂血症的发生和发展，本研究为辣木叶降脂颗粒的保健作用提供了一定的实验依据。