五味子乙素通过半胱天冬酶凋亡途径对抗高糖诱导的心肌细胞氧化应激损伤

杨帆 吴建军

(1.哈尔滨医科大学附属第二医院心肌缺血教育部重点实验室，黑龙江 哈尔滨150001；2.哈尔滨医科大学附属第二医院心血管内科，黑龙江 哈尔滨 150001)

糖尿病是因胰腺中胰岛素生物利用度降低和/或外周组织的胰岛素敏感性降低引起的。许多动物和人类研究中都证实了糖尿病与心脏疾病具有关联性[1]。学者们提出由糖尿病所导致且与血管及瓣膜病变无关的一种心脏疾病称为糖尿病心肌病[2-3]。1型糖尿病发病的核心机制是遗传-免疫因素交互作用导致的胰岛β细胞特异性损伤，造成胰岛素分泌绝对不足；而2型糖尿病的发病机制更为复杂，涉及能量代谢异常、微血管障碍和糖基化产物增多等[4-6]。基础研究中常使用链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)诱导1型糖尿病模型，排除脂类代谢异常对实验结果的影响。

五味子乙素(schisandrin B，Sch.B)是五味子属植物中的一个活性单体，近年来，国内外的文献都证实了Sch.B的抗氧化、抗肿瘤和抑制细胞增殖等作用[7]。本研究证实了Sch.B可通过抑制氧化应激，减少糖尿病心肌病状态下的心肌细胞凋亡。

1 材料和方法

1.1 主要试剂

Sch.B购于北京索莱宝公司，STZ购于Sigma-Aldrich公司。胎牛血清、细胞培养基和半胱天冬酶(caspase)-3活性检测试剂盒购于Thermo Fisher Scientific公司，线粒体分离试剂盒购于碧云天公司。抗caspase-3、抗caspase-9和细胞色素C(cytochrome C，Cyt C)由Cell signaling technology提供。H9c2大鼠心肌细胞系购于中科院上海科学研究所。

1.2 动物模型的制备及实验分组

9只Wistar大鼠在食物和饮水自由的环境(21～26 ℃，50%～60%的相对湿度，12 h光照/黑暗周期)里饲喂。适应性喂养1周后随机分为两组：连续3 d腹腔注射STZ 40 mg/kg建立糖尿病大鼠模型组(n=6)和腹腔注射等量10 mg/mL柠檬酸钠溶液的对照组(n=3)。……