影响孔雀石绿快检结果准确性的调查分析报告

◎ 黄远标，王 兰，吴丽娟，陈碧聪，蔡 晨

（河源市食品检验所，广东 河源 517000）

孔雀石绿是杀菌和消灭寄生虫的药物，因其在细菌合成过程中能阻止蛋白肽的形成而具有杀菌效果，被广泛用于水产养殖和运输领域[1]。孔雀石绿对水产品的水霉病有特效，但长期超量使用可致癌，我国农业部已将其列为水产品养殖过程中的禁药。由于没有低廉有效的替代品，孔雀石绿在水产养殖中的使用屡禁不止，严重影响水产品的质量安全，给消费者带来食品安全隐患。快速检测结果的准确性直接影响人们对食品质量安全的判断，影响快速检测结果准确性的因素较多，如样品前处理、检测环境、仪器设备、检测试剂和检测人员等。因此，在快速检测实验过程中要对影响准确性的因素做好全面监控，保证实验结果的准确性，及时研判食品安全问题，保证水产品中孔雀石绿不漏检不误检。

自开展农贸市场食用农产品快检工作以来，河源市有41家农贸市场开展日常农产品快速检测，并纳入每年的监督和质量评价，全年共抽样食用农产品快速检测达15万批次，零售市场每天10批次抽检量[2]，对水产品按照零售市场快检批次数量要求抽样快检[3]。在2021年农贸市场食用农产品快检工作监督及质量评价情况考核中，河源市年度评价平均分高于广东全省评价平均分，但是市场优秀率却远远低于全省地市平均分。在2021年河源市全年水产品7 404批次抽检中孔雀石绿问题发现率为0.39%，问题发现率非常低。因此，为提高河源市在水产品中孔雀石绿检测项目上的准确性，提高问题发现率和预警防控能力[4]，使快检工作更加规范化，对2021年河源市农贸市场水产品中孔雀石绿问题发现率进行调查分析。

1 对象与方法

1.1 调查对象

对广东省已开展农贸市场食用农产品快检快筛的6个县区、41个农贸市场进行调查。目前农贸市场快检工作均由监督部门承担，6个县区共设有10个集中快检点，每个县区快检人员均在4人以上。采集10个快检点的快检资质、快检数据、快检操作和快检人员匹配相关信息数据。

1.2 调查方法

前期对集中检测的10个快检点进行实地观察，对快检实验室快检设施设备情况、资金分配、快检任务、快检能力及人员架构进行访谈调查。后期收集快检数据，汇总各县区存在的问题，对快检人员进行问卷调查，现场填写调查问卷。

2 结果与分析

2.1 水产品快检结果数据分析

通过调查统计，自2017年开始开展水产品快检，快检批次逐年增加，2017年6 000多批次，占比总快检批次6.70%，而后逐年增加[5]，每年的水产品占比快检批次都为6.0%以上，而2021年却由10 000多批次降到7 000多批次[6]，占比总快检批次5.07%。水产品阳性样品批次2017年为48批，2018年148批，2019年174批，2020年151批，2021年阳性样品批次才62批。2017年阳性检出率为0.75%，2018年1.69%，2019年1.8%，2020年1.49%，2021年则为0.84%。批次减少，检测项次增多，多项次筛查与重点品种针对性项次筛查不同，其中孔雀石绿问题发现率低与针对性项次筛查有关。在增加其他项次筛查的同时，必然会减少对孔雀石绿项次筛查，在重点品种快检批次符合达标要求情况下，为确保安全有可能无形中避开了高风险项目的筛查[3]。

2.2 农贸市场食用农产品快检工作存在的问题

通过调查发现，6个县区共有10个集中快检点，农贸市场食用农产品快检工作均存在以下问题。①原始记录不规范，部分样品的检测结果难以溯源。记录的检测项目与实际的检测结果（胶体金留档照片）不一致、信息不完整；不同市场的检测结果重复使用、过程难以溯源。②抽样不规范，部分市场存在抽检时间集中与品种集中的问题。抽样单信息记录不完整，水产品抽检品种覆盖面窄，未覆盖市场内售卖的鱼、虾、贝类等重点品种等。③质量控制制度不完善，对快检产品疏于管理，储存不当，对第三方机构快检工作的监管力度和频次不够。个别第三方机构存在对快检人员管理不到位、未落实质量控制相关要求、未进行快检设备管理维护、未开展快检试剂技术性验收、出入库台账信息不完整等情况。④快检人员操作不规范。个别市场快检人员存在问题样品未开展跟踪快检；初检、复检时间间隔短，复检程序不规范；实验操作未严格遵照指导书，未能避免样品交叉污染等情况。

2.3 承担农贸市场食用农产品快检机构资质情况

6个县区中有3个县区农贸市场食用农产品检测工作由同一家第三方快检技术机构承担，两个县由各自不同的第三方快检机构承担，另外一个县则由其基层监管所承担。在2021年质量考核评价中，6个县区共3个不同的第三方快检机构，在考核市场问题发现率指标上有2个快检机构市场问题发现率均较低，41个市场只有一个快检机构评到一个优秀市场。现场对快检人员的盲样考核，3个第三方快检机构平均盲样正确率为92.92%。

2.4 现场快检人员调查问卷情况

调查问卷采取对河源市农贸市场食用农产品快检人员现场答卷、电话问卷以及网上答卷等方式进行，主要对快检检测专业知识水平、快检检测操作熟练程度、快检检测情况的突发应变能力3方面进行答卷调查。调查发现，从事农贸市场食用农产品快检的人员，85%以上是高中及以下学历，15%具有大学学历的人员专业并不涉及检验检测以及食品类或是农业类方面知识。从事农贸市场食用农产品快检工作两年内的快检人员为41%，从事农贸市场食用农产品快检工作3年以上的人员为59%。86%以上的快检人员并不能说出最新的农药残留限量执行标准和兽药残留限量执行标准。69%快检人员不清楚孔雀石绿快检试剂盒相关注意事项。调查中还发现存在以下问题。①快检人员的学历普遍不高，快检人员意识不强，专业素养不高，从事快检工作基本上为兼职，不是专职人员，具备专业的农业相关知识以及食品检测相关知识的专业人员几乎没有，虽经过一定的岗前培训，但专业检测技术知识依据匮乏，对快检相关检测操作知识缺乏一定的分析能力。②每个快检人员基本上负责两个农贸市场的快检样品抽样检测，并于每日上午10:00前出快检结果并公示，工作任务量大，检测时间紧迫，对于农药残留项目样品前处理相对简单，而水产品的孔雀石绿、硝基呋喃类等项目的快检前处理过程相对琐碎，注意事项较多，耗时较长，若是阳性结果再复检一次时间上会相当紧张，有可能在检测过程中出现懈怠敷衍情况。③现场快检人员检测过程中未严格执行检验操作规程，不做防护措施。④快检人员对快检试剂的验收标准并不了解，对快检试剂盒的检出限大部分人员也并不了解，甚至并不清楚胶体金快检试剂盒的检出限范围。

2.5 快检试剂盒验收程序

在中国渔业质量与标准2020年和2021年度水产品药物残留快速检测产品筛选验证结果的通报中[7-8]，某商家的孔雀石绿快检产品检测验证均符合判定要求，目前河源市6个县区常使用的也是该商家产品。广东省根据《食品快速检测产品评价技术规范》以及《食品快速检测方法评价技术规范》对快检试剂盒进行了考核评价，通过的快检试剂盒商家中，兽残胶体金快检产品对应快检项目共11个，快检方法与法检方法确证验证符合率为92.09%，符合要求的快检产品生产企业有20家，该商家也在其中。各县区快检室快检试剂盒的采购均在通过省评价考核的试剂盒商家名单中选择。为确保快检试剂盒的准确性，应实施开展一系列的质量控制和质量监督程序，制定农残兽残快检试剂的验收规程，确保所购买的、影响检测的试剂经过检查和验证符合检测标准和规范要求。兽药残留胶体金法试剂验收方式是从待验收的同批次试剂盒随机选取2盒，再随机从2盒中抽取1～2份胶体金卡，进行试剂空白试验及加标平行试验，对每一批次购进的快检试剂盒都进行了产品验收。

2.6 测试孔雀石绿快检试剂盒结果

河源市6个县区的快检实验室使用的孔雀石绿胶体金快检试剂盒都由同个商家生产，在免疫胶体金快速检测水产品孔雀石绿残留的质量分析和评价中，当鱼糜样品中孔雀石绿残留量为2.0 μg·kg-1时[9]，该商家产品的灵敏度与商品标识相符，且批间稳定性好。以鱼类草鱼、罗非鱼样品为基质，不同部位均分开测试，从3个不同部位取样，结果显示在氮吹完全吹干的情况下罗非鱼不同取样部位的检测结果都一致，胶体金CT线显色非常明显。但在氮吹未完全吹干的情况下，胶体金CT线显色的深浅不同，只取背脊肉的检测结果CT线显色非常明显，其他部位的检测结果显色较为暗沉。草鱼在测试过程中，不同取样部位在氮吹吹干与未吹干的情况下的检测结果不同，只取背脊肉在氮吹吹干的情况下胶体金的CT线显色明显，未吹干的情况下颜色暗沉，结果一致。取未去皮的鱼肉氮吹吹干的结果与未吹干的结果完全相反，这就说明实际操作中会出现假阴性或假阳性的结果，如果不按照规范操作就会出现误判，对后续处理带来不良影响。

3 建议

影响孔雀石绿快检结果准确性的因素主要是人员专业素养不高、快检操作不够规范。随着胶体金技术的进步与成熟，食品快检的检测时间与准确度将进一步提升，更加需要技术人员规范性操作从而凸显快检产品的优势，提升食用农产品快检能力。食用农产品水产品中孔雀石绿快检结果准确性的提高，需要进一步加强对快检人员的专业检测技术培训，尤其要培训水产品取样、前处理的注意事项以及样品检测操作步骤、孔雀石绿快速检测方法专业知识等，形成培训机制并进行考核，提高快检人员的专业素养。另外，还要加强对快检工作的质量监督与评价，对快检人员进行现场考试，对制度管理实施情况、抽样检测情况等进行一系列的考核，并将考核结果与快检实验室绩效相联系，采取优胜劣汰竞争模式。同时，要加强快检实验室的质量控制措施，增加快检人员实验比对，对检测样品进行质量控制和样品分析等，从而提高河源市农贸市场食用农产品水产品孔雀石绿项目快检结果准确性，减少误判带来的经济损失，以防有害食品流入销售市场。