猪病诊断和防治中PCR技术的应用研究

范文萍

摘要 生猪规模化、集约化养殖发展背景下，猪病呈现出高发趋势，轻则影响生猪健康生长发育，重则导致死亡，因此积极做好猪病诊治工作尤为重要。猪病诊断与防治中，PCR 技术发挥着重要作用，能够显著提升猪病诊治效率与准确性，为猪病防治工作的开展提供便利与帮助。基于此，本文首先概述了 PCR 技术;其次分析了猪病诊断与防治中 PCR 技术的具体应用;最后探讨了 PCR 技术在猪病诊断与防治中的应用发展。

关键词 生猪;疫病;诊断;PCR 技术;应用

生猪养殖规模、数量持续增加的背景下，猪病种类越来越多， 混合感染病例增加，这极大的提升了猪病诊断与防治难度。PCR（聚合酶链式反应）技术属于分子诊断技术，其具备特异性、敏感度高、方便快捷的优势，因而非常适用于猪病诊断与防治中。

1 PCR 技术概述

PCR 技术也被称为基因扩增技术，该技术的出现是生物学研究的巨大突破。PCR 技术的优势在于扩增速度快、特异性高、操作简 便，在较短时间内能够快速扩增目的基因，并检测微量目的基因。现阶段，随着 PCR 技术快速发展与进步，传统 PCR 技术得到了进一步 的创新，多重 PCR 技术、RT-PCR 技术、荧光定量 PCR 技术应运而 生，在生猪疫病诊断及防治工作中，发挥着不可替代的作用[1]。

2 猪病诊断与防治中 PCR 技术的具体应用探讨

2.1 应用于猪 2 型圆环病毒检测中

猪 2 型圆环病毒是目前已知的最小的动物病毒，该病毒主要 包括两个血清，分别是 PCV1 和 PCV2。两者相比较而言，PCV1属于不致病性病毒，而 PCV2 则属于致病性病毒，因此在临床上主 要以 2 型圆环病毒为主，该类病毒最易于感染刚断奶的仔猪，病猪表现生长发育迟缓、消瘦、不愿进食、精神状态不佳等症状，严重的 会引发多器官衰竭，致死率较高，即使治愈病猪生长发育受限。临 床上，感染 2 型圆环病毒的生猪，其临床症状较为综合，这极大的增加了诊断难度，并且该病毒经常以亚临床感染的形式出现，常易 被忽视。为提高猪 2 型圆环病毒病诊断有效性和准确性，要重视对 PCR 技术的应用，通过建立荧光定量 PCR 检测法，其性能更加理 想，能够特异检测 PCV1 和 PCV2 两种类型病毒，并且不会和其他 病毒产生交叉反应，其灵敏度更高，因而被广泛应用于猪圆环病毒诊治中，同时也为防治工作的开展提供重要的依据。

2.2 应用于猪瘟病毒检测中

近年来，猪瘟发病率逐年升高，对生猪养殖业发展造成了巨大 的危害，养殖场户经济损失严重，影响生猪养殖积极性。虽然做好 防疫工作能够有效降低发病率，但猪瘟病仍时有发生。临床上，猪 瘟病和猪丹毒、猪肺疫以及猪副伤寒等多种疾病临床症状相似，易 于被误诊，延误救治时机，如何提升猪瘟病毒的临床诊断效果成为 思考的关键问题。应用 RT-PCR 检测技术，能够实现对猪瘟病毒的快速有效检测。在过去的一段时间里，猪瘟病毒检测主要以免疫血清学方法为主，该法不具备较高的可靠性，而 RT-PCR 检测技术具备灵敏而且用途广泛的优势，当前在猪瘟病毒检测中发挥着不可 替代的作用，能够分别扩增出猪瘟病毒的特异性核酸序列，从而实 现对多种相似病毒的有效区分，避免出现误诊等现象，便于及时展 开防治工作，降低死亡率[2]。

2.3 应用于猪繁殖障碍与呼吸综合征检测中

母猪养殖中，繁殖障碍与呼吸综合征发病率较高，危害大，患 病母猪繁殖性能明显下降，屡配不孕，或者极易流产、死胎，严重的则无法繁殖，这对于生猪养殖业稳定发展是极为不利的。该病属于 急性、高度传染性疾病，如防治不及时，极易在短时间内大面积传 播扩散，因此积极做好诊断与防治工作尤为重要。猪繁殖障碍与呼吸综合征诊断中，传统检测方法复杂、耗时长、准确性低，并且该病临床症状和猪瘟较为相似，易于出现误诊的现象。将 PCR 技术应用于猪繁殖障碍与呼吸综合征检测中，利用反向式聚合酶链式反 应实施检测，选取新鲜样品进行电泳实验，同时要保证样品外形完整且具有三条 RNA，然后对 cDNA 进行提取、反转录，恒温 -20℃ 1 周后即可出现降解反应，该法检测效率高，准确性高，值得应用。

2.4 应用于猪病混合感染检测中

近年来，病毒混合感染发病的几率明显升高，不仅诊断难度加 大，而且治疗难度明显升高。针对混合感染的病猪，传统检测技术或者单纯依靠经验的检测方法所存在的弊端日益突出，早已无法 满足猪病检测效率和质量方面的需求，进而延误猪病最佳诊治时机，增加死亡率，造成巨大经济损失。将多重 PCR 技术应用于猪病混合感染检测中，具备突出的优势，能够同时检测多种病毒，快速、 精准呈现检测结果，及时展开后期的治疗工作，有效降低病猪死亡 几率，维护养殖场户经济效益。如：临床上猪瘟、附红细胞体病以及链球菌病合并感染、猪繁殖障碍与呼吸综合征和猪附红细胞体病混合感染的病例较为常见，应用多重 RT-PCR 方法，检测敏感度和 特异性远远高于传统检测方法，极大地提升了猪病混合感染的检测有效性。

2.5 应用于猪口蹄疫检测中

口蹄疫属于烈性传染性疾病，传染性强，危害性大，严重危害生猪养殖业稳定发展。应用 PCR 技术检测猪口蹄疫病毒，结合聚合酶 3D 基因片段以保守区域方式实现探针以及引物的设计，在扩 增区内口蹄疫病毒 A、C、O 型序列完全相同，同时应用探针和引物，建立荧光 PCR 方式，然后进行猪口蹄疫病毒检测，能够有效地 克服传统检测技术准确性差、敏感性差的问题，而且检测效率较快，并不会造成环境污染等现象，因此在猪口蹄疫病毒中实现了广 泛有效的应用。

2.6 应用于猪寄生虫病检测中

在猪寄生虫病检测中，PCR 技术也发挥着至关重要的作用。应 用 PCR 技术时，能够将一小段目的 DNA 迅速扩增至上百万倍，进 而实现对单个虫体、部分虫体微量 DNA 的快速有效检测。不仅如 此，应用 PCR 技术检测寄生虫病，其操作过程非常简单方便，并不 需要分离钝化病原，不会受到抗体和抗原持续存在的干扰与影响， 能够直接实现对病原体 DNA 的检测，同时亦可应用于鉴别虫种和 株，提高猪寄生虫病检测准确性与有效性。当前，PCR 技术在猪弓 形虫、毛圆线虫等猪常见寄生虫病的检测中实现了良好应用。

3 PCR 技术在猪病诊断与防治中的应用发展探讨

在接下来的时间里，PCR 技术在猪病诊断及防治中将会成为 有效的手段之一，应用多重 PCR 技术快速检测诊断不同病原将成 为可能。目前，猪病检测中 PCR 技术的应用呈现出诸多的缺陷，但随着科技的不断发展与创新，PCR 技术将会进一步完善，在猪病诊断中的应用将会起到更加突出的效果。新时期，PCR 技术将会朝着 自动化、微量化、标准化的方向发展，在猪病检测研究中的应用将 会更加广泛。

4 结语

综上所述，近年来，猪病的频频发生，严重阻碍生长养殖业稳 定发展。将 PCR 技术应用于猪病诊断中，有助于提升猪病诊断效 率和质量，因此要重视对 PCR 技术的应用，充分发挥其优势，减少猪病误诊几率，为猪病预防和治疗工作的开展提供有利的参考，助 推生猪養殖业健康稳定发展。

参考文献：

[1] 王庆伟，王得明.猪病诊断和防治中 PCR 技术的应用研究[J].新农业，2020（1）：52-53.

[2] 罗廷荣，莫扬，吴文德，等.RT-PCR 技术检测猪瘟病毒的应用研究[J].中国预防兽医学报，2017（4）：307.