柳州地区儿童呼吸道感染流感嗜血杆菌的流行病学特点及耐药性*

韦忠厅，覃培栩，高 杨

1.广西科技大学第二附属医院检验科，广西柳州 545001；2.柳州市妇幼保健院检验科，广西柳州 545001；3.柳州市妇幼保健院输血科，广西柳州 545001

流感嗜血杆菌是引起儿童细菌性感染的常见病原菌，其检出率在革兰阴性菌中位于第3位，并且呈逐年上升趋势[1]。流感嗜血杆菌主要寄居于人体的鼻咽部，当机体抵抗力下降时，其便可引起多种器官或组织的感染。目前，关于柳州地区儿童呼吸道感染流感嗜血杆菌的季节分布、感染儿童性别分布特点及菌株耐药性的研究较少，为了给临床诊疗及流行病学研究提供数据支撑，本研究对此进行了相关分析，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年7月至2021年6月在柳州市妇幼保健院住院治疗的年龄≤14岁的呼吸道感染患儿5 241例为研究对象，所有患儿均符合呼吸道感染的诊断标准[2]，其中男1 999例，女3 242例；0～1岁1 441例，>1～3岁1 607例，>3～6岁1 118例，>6～9岁656例，>9～12岁376例，>12～14岁43例；春季就诊1 237例，夏季就诊1 284例，秋季就诊942例，冬季就诊1 778例。

1.2方法

1.2.1标本釆集 釆用一次性吸痰器从鼻腔进入，在咽部抽吸出痰液置于痰液收集器中，并于2 h内送检。痰液标本涂片镜检以鳞状上皮细胞<10个/低倍视野，白细胞>25个/低倍视野，或两者比值<2/5视为合格，剔除不合格标本。

1.2.2流感嗜血杆菌鉴定及药敏试验 将痰液标本接种于血平板和巧克力平板，于35 ℃、5.0% CO2培养箱中培养18～24 h,如菌株在血平板上不生长或生长不良,而在巧克力平板上生长出灰白、湿润、透明或半透明、中等大小的菌落，且染色镜检为革兰阴性短小杆菌，则考虑为嗜血杆菌,进一步做因子筛查试验(Ⅹ、Ⅴ、Ⅴ+Ⅹ因子),只在Ⅴ+Ⅹ因子纸片周围生长者鉴定为流感嗜血杆菌,如结果为可疑则用VITEK2-Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统、配套鉴定卡(NH卡)进一步鉴定。对检出的流感嗜血杆菌进行药敏试验。质控菌株为流感嗜血杆菌ATCC 49247。

1.2.3β-内酰胺酶检测 采用头孢硝噻吩纸片法，将待检菌落涂在湿润纸片上，在规定时间内纸片变红为阳性,不变色为阴性。

1.3统计学处理 釆用WHONET5.6软件和SPSS20.0软件进行数据分析。计数资料以例数或百分数表示，组间比较釆用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1病原菌分布情况 从5 241份标本中检出流感嗜血杆菌1 179株，检岀率为22.50%，位于所检出病原菌的第2位；肺炎链球菌检出率高于流感嗜血杆菌，为24.94%，见表1。

表1 检出率位于前5位的病原菌

2.2不同性别、年龄及季节流感嗜血杆菌检出情况 男性患儿中检出流感嗜血杆菌的有477例，女性患儿中检出流感嗜血杆菌的有702例，不同性别患儿流感嗜血杆菌检出率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。不同年龄患儿流感嗜血杆菌检出率差异有统计学意义(P<0.05)，其中>12～14岁年龄组检出率低于其余各组，差异有统计学意义(P<0.05)。春季与夏季、秋季与冬季流感嗜血杆菌检出率比较，差异无统计学意义(P>0.05)，而春季、夏季流感嗜血杆菌检出率高于秋季与冬季，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 不同性别、年龄及季节流感嗜血杆菌检出情况

2.3β-内酰胺酶阳性率 在检出的1 179株流感嗜血杆菌中，β-内酰胺酶阳性630株，阳性率为53.44%。

2.4流感嗜血杆菌药敏试验结果 流感嗜血杆菌对头孢噻肟、利福平、氧氟沙星、氯霉素、四环素的敏感率>90.0%；对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢呋辛、头孢克洛、复方磺胺甲噁唑的敏感率<50.0%，见表3。

表3 流感嗜血杆菌药敏试验结果(%)

续表3 流感嗜血杆菌药敏试验结果(%)

3 讨 论

流感嗜血杆菌是引起儿童呼吸道感染的重要病原菌，本研究5 241份标本中，检出流感嗜血杆菌1 179株，检岀率为22.50%，位于所检出病原菌的第2位。>12～14岁年龄组流感嗜血杆菌检出率低于其余各组，差异有统计学意义(P<0.05)，说明该年龄段儿童感染流感嗜血杆菌的风险较低，而0～12岁儿童是感染流感嗜血杆菌的高风险人群。但相关研究报道，5岁以下儿童的流感嗜血杆菌检出率最高[3-4]，与本研究结果略有差异，考虑与纳入研究的人群及地区差异有关。年龄较小的儿童更易感染流感嗜血杆菌可能与该部分儿童机体免疫系统发育尚未成熟有关。

进一步分析不同季节流感嗜血杆菌的检出率，结果显示，春季、夏季流感嗜血杆菌检出率高于秋季与冬季，差异有统计学意义(P<0.05)，说明春季、夏季是流感嗜血杆菌感染的高发季节，这和赖国祥等[5]报道的冬季流感嗜血杆菌检出率最高的结果不符，但与田俊华等[6]报道的春季流感嗜血杆菌的检出率最高一致，不同研究间结果存在差异可能与各地的气候、地理环境不同有关。本研究中，春季、夏季检出率高可能与该季节柳州地区的空气湿度较大、温度较高，有利于流感嗜血杆菌的生长与传播有关，也提示临床应在春季、夏季重视儿童流感嗜血杆菌感染的防治，加强宣传教育[7]。

本研究中，检出的1 179株流感嗜血杆菌中β-内酰胺酶阳性率为53.44%，阳性率较高，提示临床在治疗儿童流感嗜血杆菌感染时应使用带有酶抑制剂的抗菌药物，但阿莫西林/克拉维酸除外(耐药率较高)。同时药敏试验结果显示，本研究检出的流感嗜血杆菌对二代头孢菌素头孢呋辛和头孢克洛的耐药率>70%，临床经验性抗感染治疗时应慎重选择。此外，本研究中流感嗜血杆菌对氧氟沙星、氯霉素、四环素的敏感性高，与吕志勇[8]的研究结果类似，推测出现该结果可能与儿童具有该类药物的使用禁忌证，临床较少应用有关。

综上所述，柳州地区呼吸道感染患儿中，0～12岁患儿流感嗜血杆菌的检出率较高，春季和夏季是流感嗜血杆菌检出率较高的季节；所检出的流感嗜血杆菌中，产β-内酰胺酶菌株检出率较高。在经验性抗感染治疗的基础上积极完善药敏试验，合理选择抗菌药物是治疗流感嗜血杆菌感染的关键。