滑鼠蛇横纹肌肉瘤的临床症状与病理学观察

黄潇航 陈 榕 彭佳佳 李诗艺 贺金峪 王诗晨张 龙 白云鹏 祁保民 黄志坚 殷光文*

(1.福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)，福州，350002；2.福建省动物药物工程实验室，福州，350002；3.福建省农业科学院畜牧兽医研究所，福州，350013)

肿瘤病是困扰动物的一种常见疾病，诱发原因较多。肿瘤对宿主动物的危害，主要是通过血液、淋巴组织等转移、侵袭其他器官，或直接侵袭周围组织，对其他器官和周围组织的血管产生一定的影响，造成出血、感染，甚至导致机体的消耗，出现严重的恶病质、全身转移性病变。肌肉瘤是多发生于肌肉组织间的肿瘤病，其中，骨髓转移性横纹肌肉瘤具有弥漫浸润的中等大型异型细胞、胞质量少和核不规则等临床特征[1]。Matsuo等[2]报道了分泌瘤出现肌间转移的临床病例，Howe等[3]提出CT等手段对肌肉瘤的诊断具有重要的辅助作用，Pretell-mazzini等[4]认为骨骼肌转移经常表现为可触及的疼痛肿块，伴有或不伴有肿胀。软组织肉瘤的形成是骨骼肌癌转移的重要标志，尽管目前对于肿瘤的临床鉴别及诊断方法已经有了较大发展，但是病理学诊断依旧是肿瘤诊断的金标准。

国内关于蛇类肿瘤性疾病的报道资料较少，笔者近期接诊1例滑鼠蛇(Ptyasmucosus)横纹肌肉瘤案例，是国内首次针对滑鼠蛇自发性肿瘤病的临床病理研究，供同行参考。

1 病例简介

雌性滑鼠蛇，体长210 cm，体重1.33 kg，体表鳞片较为杂乱，精神沉郁，食欲废绝，腰椎部位有2个大小较明显的瘤状突起，运动机能下降。饲主口述该蛇育肥期曾使用自家调制的混合饲料，平时主要饲喂脱毛雏鸡和雏鹌鹑。

2 诊断方法

2.1 常规诊断

触诊瘤状突起后，使用X光对病蛇疑似肿瘤部位进行正位和侧位拍摄。

乙醚麻醉后心脏采血，采用爬行动物专业血液生化指标检测盘检测滑鼠蛇血液生理生化指标。采用血细胞板进行人工血液细胞计数。

2.2 病理学诊断

在滑鼠蛇救助无效死亡后，经饲主同意，常规剖检。对肿物外观形态学观察，按照组织固定、包埋、切片等步骤，采用苏木精-伊红染色法(HE染色)进行肿瘤病理学研究。染色主要步骤为：切片入苏木素染液2 min，自来水清洗，分化液分化，自来水清洗，返蓝液返蓝，流水冲洗，伊红染液染色3 min。切片委托福州都拜特生物公司制备。

3 结果与分析

3.1 临床检查

临床观察滑鼠蛇体表有较明显的卵圆形瘤状突起。触诊发现，突起质地坚实，无波动感，触诊无剧烈反应。肿物导致滑鼠蛇运动受到较大限制，游动缓慢。

3.2 实验室检查

通过穿刺采集肿胀部位的内容物进行细胞学检测和细胞计数。小肿物进针难度较大，阻力较强，针头采集组织成分可见大量蛋白质沉淀物质，未见显著的细胞成分。细胞计数结果表明，病蛇血象出现幼稚型红细胞，异嗜细胞为33%，单核细胞为48%，淋巴细胞为19%，未见幼稚型淋巴细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。

3.3 影像学检查

X光影像未显示肿物内部有骨组织结构，但出现实质化，并存在钙化灶，大体色泽浅于骨影(图1)。

图1 滑鼠蛇肿瘤生长部位X光检查结果Fig.1 X-ray examination of tumor growth site of Ptyas mucosus

3.4 血液检查

滑鼠蛇血液生化检测结果见表1。

表1 滑鼠蛇血液生化检测结果

3.5 临床剖检

剖检可见2个肿物位于体腔脊柱内侧，呈结节性增生(图2A)。小肿物横径为6.0 cm，外观呈白色，形状不规则；大肿物横径为8.0 cm，外观呈黑色，形状似圆球(图2B、C)。小肿物表面光滑，质地较硬，内部为实质增生，切开后可见较典型的白色分层，质地由外到内逐渐变软(图2D、E)；大肿物为实质，内有少量脓液堆积，摘除后有大量的恶臭气味，内部呈现分层结构，为肉质增生，质地较硬，外部层腐烂，部分伴有少量脓性增生(图2F)。

图2 滑鼠蛇肿物病理剖检结果Fig.2 Pathological analysis results of Ptyas mucosus

3.6 组织病理学观察

镜下小肿物(图3A-D，HE，×100)中可见大量具有嗜酸性胞浆的、组织细胞样细胞的增生(黑色箭头指示)，局部可见大量粉色的、具有多核的巨细胞(红色箭头指示)及大量钙化灶(黄色箭头指示)，局部结构疏松，大量毛细血管扩张(绿色箭头指示)。大肿物(图4A、B，HE，×100)中可见大量具有嗜酸性胞浆的、组织细胞样细胞的增生(黑色箭头指示)，局部可见大量具有多核的巨细胞(红色箭头指示)及较多钙化灶(黄色箭头指示)，局部坏死(绿色箭头指示)，可见较多毛细血管淤血扩张(蓝色箭头指示)。纤维组织大片坏死，胞核固缩深染或碎裂溶解，可见较多钙化灶(黑色箭头指示)，偶见少量嗜碱性粉末物质，疑似菌团(红色箭头指示)(图3C、D，HE，×100)。钙化灶的存在与X光检测结果一致。

图4 滑鼠蛇大肿物的组织病理(HE，×100)Fig.4 Histopathological observation of Ptyas mucosus large tumors(HE，×100)

经组织病理学诊断，结合生前临床检查分析，判断滑鼠蛇罹患横纹肌肉瘤，横纹肌肉瘤导致机体营养障碍是死亡的主要原因。

4 讨论

滑鼠蛇的养殖技术在国内已较为成熟，而肿瘤病是困扰我国蛇类集约化养殖的一种较为常见的疾病，导致肿瘤性疾病发生的诱因有很多，如营养因素，细菌、病毒和寄生虫等微生物的侵袭干扰，或改变细胞正常的基因表达等，但相关的临床报道较少。王珊珊等[5]在国内首度报道了乌苏里蝮(Gloydiusussuriensis)多器官罹患软骨肉瘤的病例，探讨了软骨组织构成，发现其间有不规则的钙化。为了提高乌苏里蝮的健康水平，路生鑫等[6]提出，在人工繁育乌苏里蝮的过程中，需要精选种蛇，对养殖种群定期筛选。Heckers等[7]在整理爬行动物的肿瘤病例时发现，20个黑色素瘤中，因血管内肿瘤细胞、内脏转移、高度多态性和/或有丝分裂形态而恶变的肿瘤有6个。Muoz-Gutiérrez等[8]向私人诊断实验室提交的4 663份蛇群肿瘤报告中，鉴定出42份色细胞瘤，其中最常见的是单细胞色素瘤，该类瘤在身体部位多以色素沉着的皮肤块或斑块形式出现。Dietz等[9]借助HE染色切片技术对在德国接诊的5例宠物蛇病例进行骨肿瘤研究，发现病例的脊柱肿瘤均为恶性软骨肿瘤，其中软骨肉瘤和去分化软骨肉瘤的比例约为2∶3。

在我国特种经济动物养殖盛行的情况下，对蛇类的大数量、高密度和集约化养殖大大改变了蛇群在野外的生活规律。随着蛇群规模化养殖，肿瘤病的发生概率也在不断增高，这可能与蛇群营养状况、机体代谢和疫病在集约化空间中的流行等因素有关。在本病例小肿物的病理切片中观察到疑似菌团(图4D)，提示肿瘤的发生以及病程发展可能与细菌存在某种关联，至于是细菌感染导致了肿瘤性疾病的发生，还是肿瘤后期病灶发展引起了细菌的继发性感染，还需要结合病原分离等手段开展进一步研究。本病例是国内首次对滑鼠蛇肿瘤病的报道，并进行病理组织学研究，为兽医对蛇肿瘤病的诊断提供参考资料。