基于高分辨质谱的甲基化心磷脂高通量分析方法的建立和应用

焦玉佩，王雪颖，许丽娜，王昱淞，刘紫琪，刘晓蕙*

（1.清华大学 蛋白质研究技术中心，北京 100084；2.清华大学 生命学院，北京 100084）

心磷脂（Cardiolipin，CL）广泛存在于高等动物、植物和微生物界，在高等动物的心肌中甚至占总磷脂的15%，发挥着调节线粒体功能和氧化应激的作用［1-2］。心磷脂几乎完全位于线粒体内膜上，在电子传导、三磷酸腺苷（ATP）产生、能量代谢及细胞凋亡等方面发挥了重要作用，是线粒体氧化磷酸化所必需的磷脂［3-5］。此外，在线粒体凋亡的不同阶段和线粒体膜动力学中，心磷脂均发挥着不可替代的作用［6-7］。糖尿病和心力衰竭等常见疾病与心磷脂含量或组成的变化息息相关［8］。巴氏综合症，作为一个心磷脂代谢缺陷疾病，为研究者提供了研究心磷脂代谢和调节异常的模型，为探索疾病病理学提供了动机［9］。因此，通过对心磷脂的定量检测有助于了解心磷脂的代谢调控机制，进一步阐明发病机理，从而对靶向治疗相关疾病提供一定的技术支持。

心磷脂作为一种双磷脂酰甘油分子，由4条不同长度、不同饱和度的脂肪酸链和1分子的三甘油骨架构成。心磷脂的检测方法有直接注射质谱法［10-11］、液相色谱-质谱联用法［12-14］等，这些传统方法均是在负离子模式下基于心磷脂不同脂肪酸链的断裂进行定性定量分析。心磷脂的4种不同脂肪酸链的排列组合，使得数据分析变得异常困难。由于不同长度、不同饱和度脂肪酸链的离子化效率差异和高丰度物质的离子抑制作用，导致低丰度物质的定量会受到一定影响［15］。……