胎母输血综合征早期体外预测方法研究进展

何佳静

摘要：胎母输血综合征（fetomaternal hemorrhage，FMH），发病隐匿，没有特异的临床症状，早期不易察觉，直到病程晚期才有明显的临床表现，造成了较高的围生儿死亡率。本文就现有的检测方法进行分析总结，以求为临床早期诊断FMH提供可靠的参考依据，降低围产儿并发症的发生率及死亡率，现综述如下。

关键词：胎母输血综合征;Hb F;K-B实验;血红蛋白电泳;流式细胞术

【中图分类号】 R457.1 【文献标识码】 A      【文章编号】2107-2306（2022）10--01

FMH是指胎儿血液通过破损的胎盘绒毛间隙进入到母体血循环，导致胎儿不同程度失血的一组临床症候群，发生在50%～70%的妊娠中。大量胎母输血可致胎儿贫血、水肿和发育受限，严重时可导致胎儿或新生儿的死亡，围生儿的病死率高达33%-50%[1]。该病发生率低，临床表现隐匿，早期诊断困难，往往诊断时胎儿已发生了严重的贫血。因此，有效、便捷、早期的体外诊断方法在临床有着迫切的需求。

1 红细胞酸洗脱试验（Kleihauer-Betke acid elution assay，KB）

目前为止，K-B实验是检测和定量FMH的主要诊断性试验[2]。将母体的外周血制作涂片，在酸性缓冲液中进行酸浴，然后经冲洗晾干后用伊红染色，含Hb F的红细胞形态完整，被染成红色，含Hb A的红细胞被破坏洗脱掉后变成空影，故未能被染色，呈苍白色，显微镜下观察并计算染成红色的细胞百分率，正常值为≤3%。虽然K-B法，是目前国内最主流的FMH检测方法，但是作为劳动密集型的纯手工实验，达到标准化是一个难题。

2 血红蛋白电泳

血红蛋白由四条链组成，其中成人红细胞中的主要血红蛋白Hb A是由α2β2组成，胎儿红细胞中的主要血红蛋白Hb F是由α2γ2组成。各血红蛋白的等电点不同，从而在一定pH缓冲液中所带的正、负电荷亦不相同，经电泳后各血红蛋白的移动方向不同，从而区分出不同的血红蛋白，进而计算其比例。Hb F的含量与含Hb F的胎儿细胞或F细胞有良好的相关性[3] ，因此，可以通过检测血红蛋白F的含量来对胎儿细胞进行确认以及定量测定。

3 流式细胞术

流式细胞术是应用特异性标记物对母体外周血中的胎儿红细胞进行标记、定量分析。目前，应用到的特异性标记物有抗-胎儿HbF抗体、抗-红细胞表面抗原以及抗碳酸酐酶抗体等[4]，通过抗体的荧光强度来量化胎儿红细胞的数量。这种方法灵敏度较高、可重复性强，能够快速诊断妊娠过程中因各种原因所致的胎儿血进入母体的情况。

4 小结

综上所述，目前存在的检测方案均是基于HbF的检测。但HbF不是胎儿红细胞所特有的，也可以是母体自身含较高比例HbF的F细胞，若妊娠妇女自身存在血液系统疾病，如β地中海贫血，再生障碍性贫血等，F细胞的水平就可能明显上升，即使没有血液系统的疾病，妊娠这一特殊的生理状态自身就可能导致部分母体外周循环中的F细胞增多[5]，从而干扰以HbF为检测目标的试验。K-B酸洗脱法是复杂的人工实验，费时、重复性低，受实验条件和人员差异的限制，且不能排除孕妇本身以及血液系统疾病造成的HbF的干扰。同样的，基于HbF的血红蛋白电泳技术也不能排出干扰。而流式细胞术高成本，且实验相对复杂，对人员技术要求较高，不适用于基层。碳酸酐酶仅在成人红细胞内分布，结合HbF的特异性抗体，运用流式细胞术对孕妇外周血进行双抗体标记，仅HbF单阳时才能说明HbF来源于胎儿红细胞，提高了流式细胞术的特异性，并排除了干扰。那么，将毛细管血红蛋白电泳与流式细胞术联合运用，通过使用毛细管电泳进行筛查，能够经济高效的实现FMH的筛查工作;对筛查结果进一步分析，在识别β地中海贫血患者的前提下，针对血红蛋白F增高的患者进一步使用流式细胞术鉴别，能够最终保证FMH确诊的准确性，实现早发现，早诊断，早治疗，改善预后，从而使广大妊娠人群受益。

参考文献：

[1] Singh P， Swanson T. Acute and chronic fetal anemia as a result of fetomaternal hemorrhage. Case Rep Obstet Gynecol. 2014;2014：296463. doi：10.1155/2014/296463

[2] Kim YA， Makar RS. Detection of fetomaternal hemorrhage. Am J Hematol. 2012;87（4）：417-423. doi：10.1002/ajh.22255

[3] MUNDEE Y， BIGELOW N C， DAVIS B H， et al. Flow cytometric method for simultaneous assay of foetal haemoglobin containing red cells， reticulocytes and foetal haemoglobin containing reticulocytes [J]. Clinical and laboratory haematology， 2001， 23（3）： 149-54.

[4] 楊玉芳，叶红，罗飞，惠燕，朱文静.胎母输血综合征临床研究进展[J].海南医学，2018，29（21）：3100-3102.DOI：10.3969/j.issn.1003-6350.2018.21.040.

[5] Cormack OM， Guilfoyle F， Flynn CM. The prevalence of an elevated F cell population in a maternal and gynaecology cohort. Transfus Med. 2019;29（5）：369-373. doi：10.1111/tme.12625