范永婵 上杭县动物疫病预防控制中心 福建上杭 364200
禽流感(Avian influenza,AI)是由A型流感病毒(AIV)引起的一种从呼吸系统到全身严重败血等多种症状的禽类烈性传染病,不仅严重危害养禽业,而且对公共卫生安全构成了极大威胁。世界动物卫生组织将其列为A类传染病,我国将其列为一类动物疫病。疫苗免疫是有效防控禽流感最重要的手段之一。为掌握禽流感疫苗不同免疫次数产生的免疫效果,进行禽流感疫苗一免和二免试验,对免疫效果进行对比与分析。
1.1 试剂禽流感病毒H5亚型Re-11株、H7亚型Re-3株血凝抑制试验抗原,阳性血清、阴性血清购自哈尔滨国生生物科技股份有限公司;1%红细胞悬液、磷酸盐缓冲液由实验室自配。
1.2 疫苗重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1Re-11株+Re-12株、H7N9H7-Re3株)来自政府统一采购。
1.3 器材一次性96孔V型微量反应板、单道与多道移液器、低速台式离心机、微量振荡器、1.5 mL离心管等。
1.4 样品来源血清样品采自上杭县临城镇4家规模禽场(2家河田鸡场、2家番鸭场)。
1.5 样品处理与保存翅静脉采集2 mL血液样品,3 000 r/min离心3 min,取上层血清倒入1.5 mL离心管并编号,置-20℃冰箱保存,备检。
1.6 检测方法根据GB/T18936-2020《高致病性禽流感诊断技术》规定,采用血凝(HA)和血凝抑制试验(HI)微量法。
1.7 结果判定HI抗体效价≥4log2,判定为免疫合格,HI抗体效价≤3log2,判定为免疫不合格;免疫抗体检测合格数达到抽检总数的70%以上,判定为群体免疫合格。
2.1 各规模禽场存栏数、免疫及样本采集情况2021年6~8月,选取临城镇饲养管理水平相当的4家规模禽场进行禽流感一免和二免免疫效果对比。……