血清总胆红素改良参考测量程序的复现及性能评价

李敏，孟祥兆，孙江漫，邵燕，于洪远（北京航天总医院检验科，北京 100076）

总胆红素是医学实验室肝功能检查的重要常规项目，其结果有助于临床医生判断患者肝脏功能、黄疸程度及类型等［1］。Doumas等开发的检测总胆红素的参考方法已获得国际认可，该方法建议使用NIST的标准物质SRM916a作为一级参考物质进行校准。目前，SRM916a已经停产，这种状态阻碍了总胆红素的标准化进程。德国汉诺威临床化学研究所在Doumas参考方法的基础上进行改良，改良参考测量程序不再依赖标准物质进行校准。本研究通过复现血清总胆红素的改良参考测量程序，并对其各项性能进行评估，观察其是否可实现临床常规实验室总胆红素检测结果的量值溯源和标准化。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与试剂 Cary100紫外-可见分光光度计（安捷伦公司），LA120S型电子天平（赛多利斯公司），reference移液器（艾本德公司），Microlab-500型稀释配液仪（Hamilton公司），Milli-Q纯水机（密理博公司）。

对氨基苯磺酸（批号：BCBJ0170V）、亚硝酸钠（批 号：1389022）、四 水 酒 石 酸 钾 纳（批 号：SLBD8827V）、氢氧化钠（批号：BCBH5016）、安息香酸钠（批 号：SLBC8803V）、EDTA-Na2（批 号：1205337）、醋酸钠（批号：SZBF2210V）（Sigma公司），咖啡因（批号：007913275）购自（AMRESCO公司）。

1.2 标本来源 （1）2020年国际参考实验室比对标本20RELA-A、20RELA-B，合格范围分别为（53.50±2.94）μmol/L、（22.43±1.23）μmol/L，胆红素国家一级标准物质GBW09184、GBW09185（有效期2021年12月），靶值±不确定度范围分别为（108.10±1.9）μmol/L、（44.60±0.8）μmol/L（k＝2），均用于方法的正确度评价；（2）收集北京航天总医院住院患者血清，无肉眼可见的溶血和乳糜，用于方法的精密度和线性评价。

1.3 方法

1.3.1 反应原理 在咖啡因试剂的存在下，胆红素与重氮试剂反应生成偶氮胆红素，酸性条件下呈红色，碱性酒石酸使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素转化为稳定的蓝色偶氮胆红素，最大吸收峰由530 nm转移至598 nm，该波长下偶氮化合物的吸光度与胆红素浓度呈正比。……