腹腔镜结直肠癌根治术后患者组织中微管相关蛋白轻链3-Ⅱ表达水平与其临床病理特征及预后的关系

王伟一 李 娟 李自强

结直肠癌(colorectal cancer，CRC)是目前世界上常见的恶性肿瘤，占所有恶性肿瘤的10%～15%，每年约导致60万例人死亡，发病率和死亡率均高，且呈上升趋势[1-2]。随着我国经济的发展和膳食结构的变化，其发病率也在逐年增加[3]。腹腔镜借助探头在直视下操作，具有创伤小以及术后恢复快的特点[4]。自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3，LC3)是参与自噬活性调控的重要基因[5]。LC3作为自噬体的重要组成部分，它包括 LC3A、LC3B、LC3C 的3种同工型，其中 LC3B 与自噬水平相关[6-7]。有研究报道称LC3 在包括卵巢癌、结直肠癌、前列腺癌、乳腺癌等多种肿瘤中异常表达[8-9]。因此本研究探讨了腹腔镜结直肠癌根治术后患者组织中微管相关蛋白轻链3-Ⅱ表达水平与临床病理特征及预后的关系。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取2018年1月至2019年1月本院收治结直肠癌患者60例，年龄54～71岁，平均(59.32 ±7.43)岁。纳入标准：①符合《中国结直肠癌诊疗规范》标准[10]，经病理或细胞学诊断为结直肠癌患者；② 患者行腹腔镜结直肠癌根治术。排除标准：①合并肠道炎性疾病、肠梗阻、肠功能紊乱等并发症；②合并其他恶性肿瘤患者；③合并其他器官严重性病变患者。

1.2 免疫组化分析LC3水平

采用免疫组织化学检测LC3表达，以鼠抗人LC3单克隆抗体为一抗，用已知阳性切片作为阳性对照，PBS代替一抗作为阴性对照，用苏木精复染细胞核，参考文献标准判断，LC3阳性产物均位于细胞核，视野中出现粗细一致的棕黄色为阳性染色，无棕色反应为阴性染色。在阳性颗粒密集部位随机选取10个200倍视野，计数每个视野中细胞的染色情况，取平均值。根据阳性细胞占全部细胞数的百分数对其进行分级，阴性为阳性细胞数<10%；阳性为阳性细胞数>10%。根据上述标准将患者分为LC3阳性组(n=39)和LC3阴性组(n=21)。

1.3 收集临床资料及随访资料

采用电话及门诊或住院复查等方式进行随访，收集患者年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤最大径等临床资料。随访时间截止2021年5月。根据随访结果将患者分为死亡组(n=25)和生存组(n=35)。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 组织LC3表达与腹腔镜结直肠癌根治术后患者临床病理特征的关系

组织LC3表达与患者年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤分化程度等临床病理特征均无相关性(P>0.05)，与肿瘤分期、淋巴结远处转移相关(P<0.05)，见表1。

表1 组织LC3表达与腹腔镜结直肠癌根治术后患者临床病理特征的关系/例

2.2 影响腹腔镜结直肠癌根治术后患者预后的单因素分析

单因素分析发现：肿瘤分化程度、肿瘤分期、淋巴结远处转移、LC3表达是影响腹腔镜结直肠癌根治术后患者预后的因素(P<0.05)，见表 2。

表2 影响腹腔镜结直肠癌根治术后患者预后的单因素分析/例

2.3 影响腹腔镜结直肠癌根治术后患者预后的多因素分析

多因素分析显示：肿瘤分化程度、淋巴结远处转移、肿瘤分期和LC3表达情况表达是影响腹腔镜结直肠癌根治术后患者预后的独立危险因素(P<0.05)，见表3。

表3 影响腔镜结直肠癌根治术后患者预后的多因素分析

3 讨论

结直肠癌属于胃肠道恶性肿瘤，主要由结肠细胞或直肠细胞发生恶性病变而来[11]。早期无特异性症状，随着肿块增大会出现便血、腹泻、局部腹痛等症状，晚期结直肠可出现贫血、体重减轻等症状[12-13]。该病的发病率、病死率较高，全球每年新发结直肠癌者高达93万人，在我国每年新发病例高达130000～160000例，严重威胁人类健康[14-15]。手术切除可以有效减轻患者痛苦，提高生存质量。与传统开腹手术相比，腹腔镜结直肠癌手术具有以下优点：①术后疼痛轻；②伤口愈合时间缩短，腹部切口相对较小美观；③胃肠功能恢复更快；④正常活动恢复快，住院时间短；⑤减少肠梗阻、切口感染等并发症；⑥提高患者术中及术后免疫力；⑦在盆底等狭窄空间内有更好的手术视野[16-17]。结直肠癌作为一个重大的负生活事件，不可避免地会对患者造成强烈的应激反应，根治手术更会加剧这种应激反应的程度。因此针对腹腔镜结直肠癌手术后患者寻找预后指标是目前临床研究的亟待解决的问题。

LC3 是酵母 Atg8p 的哺乳动物同源物，被认为是自噬体的重要组成部分[18]。它包括 LC3A、LC3B、LC3C 的3种同工型，其中 LC3B 与自噬水平相关[19]。LC3 已在多种肿瘤包括卵巢癌、脑癌、结直肠癌、前列腺癌、乳腺癌、黑色素瘤中异常表达[20-21]。LC3 表达与FIGO 分期相关[22]。LC3 表达与血管浸润显着相关；高 LC3 表达表明总体生存率(OS) 较差[23]。本研究中组织LC3表达与肿瘤分期、淋巴结远处转移情况等有统计学差异。单因素分析发现肿瘤分化程度、肿瘤分期、淋巴结远处转移、LC3表达是影响腹腔镜结直肠癌根治术后患者预后的因素。多因素分析显示肿瘤分化程度、淋巴结远处转移、肿瘤分期和LC3表达情况表达是影响腹腔镜结直肠癌根治术后患者预后的独立危险因素。提示LC3有潜力成为预测结直肠癌患者预后的生物标志物，但其中具体作用机制尚不明确，潜在的原因还需进一步试验数据来验证。

综上所述，腹腔镜结直肠癌根治术后患者组织中微管相关蛋白轻链3-Ⅱ表达水平与临床病理特征有关，微管相关蛋白轻链3-Ⅱ表达可作为预测 腹腔镜结直肠癌根治术后患者预后的生物标志物，具有重要的临床意义。但本研究中的研究对象规模较小，未进行深入研究，是否能成为结直肠癌预后的生物学标志物，还需要在今后的研究中扩大样本量以及研究范围，以此完善实验结果，确保其准确性，为新的肿瘤标志物应用于临床提供参考依据。