不同厂家非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒比对

许秀琼，刘 劼，吴立炀，叶 健，查云峰，王福广，孙柏林，卢受昇

（广东省动物疫病预防控制中心，广东省动物卫生检疫所，广东广州 510230）

非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起猪的一种急性、热性、高度接触性传染病，临床上以高热、网状内皮系统出血和高死亡率为特征，严重危害养猪业发展。世界动物卫生组织（WOAH）将其列为法定报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病[1]。2018 年8 月我国首次报道ASF 疫情[2]。目前该病尚缺乏有效的预防疫苗和针对性治疗药物，因此精准剔除阳性动物尤为重要。荧光PCR 检测方法具有敏感、快速、灵敏等优点，检出下限为6 个质粒拷贝或0.1～1.0 TCID50/mL[3-4]，是实现精准剔除的最佳方法。但近年新出现的ASFV变异毒株具有排毒量低、不易检测等特点[5]，这对试剂盒的敏感性和特异性提出了更高要求。

本试验选取了6 个厂家的ASFV 荧光PCR 检测试剂盒，参照OIE《陆生动物诊断试验和疫苗手册》（2018 年版）[3]1.1.6 章推荐的程序要求，对其特异性、敏感性和重复性进行了比较分析，以期了解各个试剂盒的性能特点及差异。

1 材料与方法

1.1 样品

ASF 阳性样品，包括血清、全血及组织；ASF阴性样品，包括组织和血清；ASFV 核酸标准物质和特异性对照，包括疫苗和抗原。ASF阴、阳性样品，由市级动物疫病预防控制中心实验室初步检测，再由广东省动物疫病预防控制中心复检确定，详见表1。

表1 样品类型、数量及来源 单位：份

1.2 设备与试剂

本次试验使用的荧光PCR 仪为罗氏LC480，所有仪器均已通过计量校准；试剂盒为6 个厂家的ASFV 荧光PCR 检测试剂盒，分别用A、B、C、D、E、F 表示，每个厂家产品各检测2 个批次；……