补骨脂二氢黄酮对神经胶质瘤细胞增殖、迁移、凋亡及ABCE1表达的影响*

吴岳珊，常 婧，葛娟娟，徐康彦，刘 溪，周 权，朱 薿，胡美纯**

(1.湖北科技学院医学部药学院，湖北 咸宁 437100；2.湖北科技学院医学部基础医学院)

胶质母细胞瘤(glioblastoma，GBM)是恶性的原发性神经胶质瘤，在人类所有类型肿瘤中致死率排名前十。目前GBM的治疗方法以手术治疗加放疗、化疗为主。但因GBM具有弥漫性，手术治疗难以完全切除，导致GBM患者易复发，生存预后较差，死亡率较高，严重影响全球人民的生命健康。因此，开发新的靶向治疗GBM药物刻不容缓。补骨脂二氢黄酮(bavachin)是一种存在于补骨脂的黄酮类化合物，具有抗肿瘤活性，能有效抑制肝癌、骨肉瘤、绒毛膜癌等肿瘤细胞的生长，但其是否对GBM有抑制作用尚不清楚。本研究通过体外实验研究不同浓度的补骨脂二氢黄酮对人胶质母细胞瘤的抑制作用，并初步探索其作用机制，为后续的临床应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

补骨脂二氢黄酮(CAS号：19879-32-4)购自上海源叶生物科技有限公司。人胶质母细胞瘤细胞(U87MG细胞)和人胶质瘤细胞(U251细胞)为本实验室保存。DMEM培养基、胎牛血清和胰蛋白酶均购自美国Gibco公司。CCK-8试剂盒(BS350B)购自中国Biosharp公司，AnnexinV-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒(C1067M)，Western及IP细胞裂解液(P0013)、BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0012S)、Western封闭液(P0023B)、SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(P0012A)、超敏ECL化学发光试剂盒(P0018S)均购自碧云天生物技术公司。Page Ruler Prestained Protein Ladder(26616)购自美国Thermo公司。GAPDH Rabbit pAb(AC001)购自ABclonal公司、ABCE1 Rabbit pAb(389078)购自ZENBIO公司。HRP标记山羊抗兔IgG(AS014)购自ABclonal公司。OLYMPUS倒置荧光显微镜(型号IX73)。ESCO CO2培养箱(CCL-170T-8)。BioTek全自动酶标仪(SYNERGY/HIX)。显影仪(IBright 1500)购自美国Invitrogen公司。Mini Trans-Blot Electrophoret转印槽、Mini-PROTEAN Tetra Cell垂直电泳系统、PowerPacBasic电泳电源、Mini-Sub Cell GT Cell水平电泳槽购自美国Bio-Rad公司。……