基于高通量测序的黑柄乳菇菌塘细菌多样性分析

秦婉琳，马永远，李双燕，伍 燕

（兴义民族师范学院，贵州兴义 562400）

黑柄乳菇（Lactarius gerardii）又名茅草菌，隶属伞菌目（Agaricales）红菇科（Russulaceae）乳菇属(Lactarius)，菌盖和菌柄呈黑褐色，菌褶白色延伸至菌柄，菌肉白色、质脆，受伤后会溢出白色乳浆，因此又叫黑盖奶浆菌；夏季多生长在针阔混交林地上，是一种美味的野生菌[1]。图1（参见封三）为野生黑柄乳菇子实体，采集地点为兴义市万屯镇云屯生态公园松林下。乳菇属在贵州比较常见，例如松乳菇（紫花菌）、多汁乳菇、红汁乳菇、靓丽乳菇等[2-3]。近年研究表明，通过人工合成松乳菇菌体并接种到天然马尾松林下，能得到松乳菇子实体[4-9]。松乳菇营养丰富，含多种氨基酸和微量元素，具有增强机体免疫力、抗氧化和抗肿瘤等生物活性[10-15]，松乳菇的栽培成功对开发利用黔西南地区的黑柄乳菇具有参考价值。

图1 黑柄乳菇子实体

菌塘（Shiro）是由子实体的根部菌丝、宿主根系及周围的腐殖质土壤扭结形成的颗粒状结构，是真菌菌丝体萌发和形成子实体的重要条件[16-17]。深入研究菌塘，对于开发人工驯化技术，了解菇类栽培土壤细菌群的组成及丰度非常重要。本文以黔西南州的野生黑柄乳菇菌塘土壤为研究对象，高通量测序菌塘菌群后采用统计聚类的方法确定不同样本优势菌群结构的分型，旨在探究黑柄乳菇生境土壤微生物群落特征，找出优势菌群、分析共性并得出规律性认识，为下一步研发黑柄乳菇的人工栽培技术奠定一些基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品采集