COX-2、HRH1、PTGS2 在腺性膀胱炎中的表达及其临床意义

2022-07-15 08:06洪涛陶逸然朴松哲柯莽
中国现代医生 2022年18期
关键词:腺性膀胱炎结石

洪涛 陶逸然 朴松哲 柯莽

温州医科大学附属台州医院泌尿外科,浙江台州 317000

腺性膀胱炎是一种以膀胱黏膜与黏膜上尿路上皮腺上皮化为特征的恶性疾病,在我国,腺性膀胱炎发病率为0.9%~1.9%。腺性膀胱炎主要表现为血尿、尿失禁等症状。环氧化酶2(cyclooxygenase2,COX-2)属于完整膜结合蛋白,是花生四烯酸合成前列腺素过程中生成的限速酶。组胺是一种炎症介质,由左旋组氨酸脱去羧基后生成,其生成后储存在嗜碱性粒细胞中,在嗜碱性粒细胞中以肝素结合形式存在,当释放到细胞外时,组胺与肝素分离后发挥活性作用。过氧化物合酶2(peroxide synthase 2,PTGS2)是机体内花生四烯酸合成前列腺素酶的前提。本文旨在研究COX-2、HRH1、PTGS2 在腺性膀胱炎中的表达及其临床意义,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

整群随机化法选取2019 年1 月~2021 年1 月温州医科大学附属台州医院收治的腺性膀胱炎患者88例为腺性膀胱炎组,同期选取膀胱炎患者88 例为对照组。纳入标准:①符合《腺性膀胱炎临床诊断和治疗中国专家共识》诊断标准;②无严重心肺脏器功能不全者;③无精神疾病、意识障碍者。排除标准:①合并其他肿瘤放化疗者;②合并其他严重脏器疾病者;③有药物过敏史者。两组的临床基线资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。见表1。本研究经温州医科大学附属台州医院医学伦理委员会批准,患者及家属均知情并签署知情同意书。

表1 两组临床基线资料比较

1.2 方法

抽取两组患者静脉血5 ml,2000 r/min 离心处理5 min,-20℃保存于低温箱中待检。

1.2.1 检测两组患者的COX-2、HRH1 水平 免疫组化染色法检测COX-2、HRH1 水平。免疫组化方法:二甲苯脱蜡2 次,100%、90%和80%乙醇梯度水化,蒸馏水、PBS 浸泡,微波修复抗原20 min,自然冷却后置于3%溶液以阻断内源性过氧化物酶活性,PBS 清洗3次,滴加抗体GRP94、AKR1B10 置于湿盒内4℃中孵育过夜,PBS 洗3 次,滴加IgC 二抗,温室孵育30 min,加链霉素生物素蛋白-过氧化物,PBS 洗3 次,DAB 显色镜下观察显色结果,适时终止反应,使用苏木素进行复染,80%、90%、100%乙醇梯度脱水、晾干,二甲苯透明,封片。观察统计数据并记录。

1.2.2 检测两组患者的PTGS2 水平 实时荧光定量法PCR 检测两组的PTGS2 水平。采集两组的外周血核细胞,Trizol 试剂提取总RNA,将总RNA 通过逆转录合成cDNA。配制样本液反应体系主要包括使用2.5μl RNA 样本液,RT、5RT 缓冲液为0.8 μl,dntps、mmlv 各为2.2 μl、4.3 μl,以上溶液相互反应25 min,温度保持在15℃。建立RT-PCR 反应检测体系cDNA、无核酸酶水均为1.36 μl,探针混合物、通用混合物各为7.59 μl、0.12 ml,肌动蛋白用作内参基因。PTGS2上游引物:5′-GATGTGTATCCTCAGAGCTTTG-3′,下游引物:5′-CGATGACAGAGATATCCCAG-3′;PTGS2上游引物:5′-ACACTCCAGCTGGGATCA CATTG -CCAGG-3′,下游引物:5′-CTCAACTGGTGTGCGTGGAG-TCGGCAATTCAGTTGAGGGTAATCC-3′,在92℃下进行化学反应,持续时间20 min,之后62℃下反应3 min,重复36 次,PTGS2 表达量用2计算得到。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 两组的COX-2、HRH1、PTGS2 水平比较

两组的COX-2、HRH1、PTGS2 水平比较,腺性膀胱炎组均高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。见表2。

表2 两组的COX-2、HRH1、PTGS2 比较()

2.2 腺性膀胱炎患者的COX-2、HRH1、PTGS2 与临床特征关系

COX-2、HRH1、PTGS2 指标水平与腺性膀胱炎患者的性别、年龄(31~90 岁)无关,差异无统计学意义(均P>0.05);COX-2、HRH1、PTGS2 指标表达水平与腺性膀胱炎患者的梗阻、感染、结石有关,差异有统计学意义(均P<0.05);有梗阻患者的COX-2、HRH1、PTGS2 水平高于无梗阻患者,有感染患者的COX-2、HRH1、PTGS2 水平高于无感染患者,有结石患者的COX-2、HRH1、PTGS2 水平高于无结石患者,差异有统计学意义(均P<0.05)。见表3。

表3 腺性膀胱炎患者的COX-2、HRH1、PTGS2 与临床特征关系(n=88,)

2.3 COX-2、HRH1、PTGS2 对腺性膀胱炎的诊断价值

ROC 分析COX-2、HRH1、PTGS2 诊断腺性膀胱炎的曲线下面积低于三项联合,差异有统计学意义(均P<0.05);三项联合检测的敏感度、准确度高于COX-2、HRH1、PTGS2 表达单一检测,差异有统计学意义(均P<0.05)。见表4。

表4 COX-2、HRH1、PTGS2 对腺性膀胱炎的诊断价值[%(n/N)]

3 讨论

腺性膀胱炎属于常见炎症疾病,其发病机制尚不明确,多认为是膀胱尿路上皮受长期慢性刺激所导致。也被认为是在慢性炎症、梗阻、结石等刺激因素作用下,经历腺体形成等系列变化进而导致腺性膀胱炎出现。当下临床中缺乏对腺性膀胱炎的研究,因此本研究旨在探讨COX-2、HRH1、PTGS2 在腺性膀胱炎中的表达及联合检测的意义。

图1 COX-2、HRH1、PTGS2 对腺性膀胱炎的诊断价值

COX-2 具有抑制免疫细胞凋亡的功能。研究显示COX-2 水平升高可导致机体免疫细胞表达降低,增加疾病发生风险。本研究结果提示腺性膀胱炎患者的COX-2 呈现高度表达,可用于预测腺性膀胱炎。HRH1 以异染性颗粒形式存储在机体肥大细胞内,组胺在表皮或基膜中表达能使机体产生瘙痒感,而当组胺在真皮层中则可使机体产生疼痛,造成血管性水肿等症状。本研究对腺性膀胱炎、膀胱炎患者体内的HRH1 水平进行分析,结果显示腺性膀胱炎患者体内的HRH1 水平高于膀胱炎患者,提示腺性膀胱炎患者的HRH1 水平普遍较高,HRH1 可作为腺性膀胱炎早期诊断的辅助标志物。

研究指出,PTGS2 在腺性膀胱炎中水平显著升高,提示腺性膀胱炎中PTGS2 表达呈现较高水平,其参与腺性膀胱炎的发展,PTGS2 在腺性膀胱炎中的作用机制:通过炎性细胞激活刺激血管平滑肌细胞迁移与增殖,增加血管通透性并发挥作用。本研究结果显示,三项联合检测腺性膀胱炎的敏感度、准确度均高于单一检测,说明联合检测比单项检测的应用价值更高,能有效提高诊断准确度与敏感度,对腺性膀胱炎患者的治疗及预后具有重要诊断价值。

综上所述,COX-2、HRH1、PTGS2 表达异常与梗阻、感染、结石相关,且三者联合检测对腺性膀胱炎诊断价值更高,为腺性膀胱炎早期诊断提供借鉴指导。

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