伊犁不同地区绵羊消化道线虫和球虫感染的季节动态调查

阎晓菲，刘宜勇，童 婷，丁克奇，邓海峰，王培明，吐来力江，热西旦，刘明军,王钰琪

(1.石河子大学 动物科技学院，新疆 石河子 832000；2.新疆农业大学 生命科学学院,新疆 乌鲁木齐 830052；3.伊犁哈萨克自治州畜牧总站，新疆 伊宁 835000；4.尼勒克县畜牧兽医工作站，新疆 尼勒克 835700；5.伊犁哈萨克自治州昭苏马场，新疆 昭苏 835602；6.新疆畜牧科学院 生物技术研究所/农业部草食家畜遗传育种与繁殖重点实验室/新疆动物生物技术重点实验室，新疆 乌鲁木齐 830011；7.新疆农业大学 动物医学学院，新疆 乌鲁木齐 830052)

消化道线虫感染是绵羊重要寄生虫病之一，涉及9科、21属、76种线虫，给畜牧业带来了巨大的经济损失。在临床上消化道线虫的感染大多为混合感染。寄生于消化道的线虫吸附于胃肠黏膜，吸食羊的血液和营养，同时虫体还可以分泌毒素，引起胃肠黏膜的损伤、炎症、出血，引发胃肠炎、消化机能障碍、消瘦、贫血和营养不良等症状，严重时可造成死亡。其对北方放牧羊群的危害尤为严重，造成的羊死亡数是传染病的2～2.75倍。20世纪 80～90年代仅青海省年均春季死亡成年羊和幼羊150×10只左右，约占年初存栏羊总数的10%。据国内外多个地区绵羊消化道线虫感染调查情况来看，由于气候、地域、生长环境不同，感染情况存在差异。

绵羊球虫感染是由艾美耳属(spp.)球虫寄生于羊肠道引起的以腹泻、消瘦、贫血和发育不良为特征的原虫病，尤其对羔羊危害较大，可使其生长发育停滞，严重时可导致大批死亡，给养羊业造成了巨大的损失。羊球虫病感染极为普遍。Koudela等调查捷克共和国的13个农场，发现羊球虫病的感染率为92.2%。Kusiluka等调查坦桑尼亚山羊球虫病的感染率为91%，绵羊球虫病感染率为93%。本研究旨在结合伊犁两个地区的地理气候条件和饲养条件，对绵羊进行消化道线虫和球虫区系调查和季节动态研究，掌握两个地区的流行规律，选取最佳驱虫时间、驱虫药物，有针对性地制定科学合理的防治措施。

1 材料与方法

1.1 主要仪器

数码显微镜及显微图像采集分析处理系统(Nikon)，电子天平(AL104，d=0.0001 g，梅特勒-托利多仪器有限公司)，改良麦克马斯特计数板(中国农业科学院上海兽医研究所)。

1.2 试剂

饱和盐水，食盐购自新疆盐湖制盐有限责任公司。

1.3 方法

1.3.1 样本采集 于2019年4月(春季)、7月(夏季)、9月(秋季)、12月(冬季)，在伊犁昭苏地区和尼勒克地区，对哈萨克羊和哈萨克与特克塞尔杂交1代成年母羊，直肠采集粪便样本(表1)。每份粪便样本20～30 g，分别装入洁净的封口袋内，记录品种、性别、年龄、芯片号、临床表现，带回实验室置冰箱4 ℃保存，待检。采样时间与驱虫时间间隔3个月。春季采样后，肌肉注射氯氰碘柳胺钠(0.2 mL/kg)和伊维菌素(0.04 mL/kg)进行驱虫；秋季采样后，口服阿苯达唑(0.15 mL/kg)和肌肉注射伊维菌素(0.04 mL/kg)进行驱虫。

表1 样本采集情况

1.3.2 定性检测及感染种类鉴定 定性检测采用饱和盐水漂浮法检查粪便中感染的虫种，取3 g粪样置于研钵中，倒入适量饱和盐水，捣碎混匀粪样，用纱布过滤后倒入青霉素小瓶至瓶口，盖上盖玻片，静置15 min，将盖玻片放于载玻片上镜检。采用数码显微镜及显微图像采集分析处理系统观察形态结构、颜色、大小，并拍照保存，参照文献进行种类鉴定。

1.3.3 定量检测及虫卵计数 定量检测采用改良麦克马斯特法，取2 g粪样置于研钵中，先加水10 mL研磨，再加饱和盐水50 mL，混匀后吸取粪液，注入改良麦克马斯特计数板的计数室内，静置1～2 min后，在显微镜下计数2个刻度室中的线虫虫卵数和卵囊数，2个计数室计数的平均值A×200即为每克粪便中的虫卵数(EPG)和卵囊数(OPG)。

1.3.4 数据计算及统计分析 计算感染率及感染强度，感染率=(感染样本数/样本总数)×100%，感染强度包括最低、最高和平均感染强度，平均感染强度=(阳性样本感染强度总和/阳性样本总数)±标准差。采用SPSS软件计算平均感染强度，使用独立样本t检验分析不同地区绵羊消化道线虫和球虫感染强度的差异性。

2 结果与分析

2.1 不同地区绵羊消化道线虫和球虫感染情况

两个地区绵羊消化道线虫和球虫感染情况见表2。绵羊消化道线虫的感染率和感染强度高于球虫。绵羊消化道线虫感染率为97.06%，球虫感染率为90.55%。绵羊消化道线虫平均感染强度为1 274.92±2 123.21(个/g)，最高达到42 300(个/g)。根据绵羊消化道线虫感染程度一般分为轻度感染(EPG<500个/g)、中度感染(EPG=500～1 000个/g)、严重感染(EPG>1 500个/g)，本研究绵羊消化道线虫感染程度可划分为中度感染。球虫平均感染强度为785.11±2 385.73(个/g)，最高达到14 4500(个/g)。根据绵羊球虫感染程度分为4类：1类无感染(OPG=0),2类轻度感染(OPG<1 800个/g),3类中度感染(OPG=1 800～6 000个/g)，4类严重感染(OPG>6 000个/g)，本次绵羊球虫感染程度大部分为轻度感染。昭苏地区和尼勒克地区绵羊消化道线虫和球虫感染情况有所不同，昭苏地区绵羊消化道线虫平均感染强度极显著高于尼勒克地区(<0.01)，尼勒克地区球虫感染率和平均感染强度极显著高于昭苏地区(<0.01)。

表2 不同地区绵羊消化道线虫和球虫感染情况

2.2 各季节不同地区绵羊消化道线虫和球虫感染情况

不同地区绵羊消化道线虫和球虫四季感染情况见表3、表4。总体上除了冬季，两个地区其他季节绵羊消化道线虫感染率均高于球虫；除了夏季，其他各季节绵羊消化道线虫感染强度均高于球虫。两个地区绵羊消化道线虫和球虫的平均感染强度呈现出春季最高、夏季次之、秋季较低、冬季最低的流行规律。

表3 各季节不同地区绵羊消化道线虫和球虫感染率

表4 各季节不同地区绵羊消化道线虫和球虫的感染强度

4个季节昭苏地区和尼勒克地区的绵羊消化道线虫感染率都在90%以上，接近于100%。除了春季，其他季节尼勒克地区感染率均高于昭苏地区；春季和冬季，昭苏地区平均感染强度极显著高于尼勒克地区(<0.01)，夏季和秋季昭苏地区平均感染强度极显著低于尼勒克地区(<0.01)。

除了夏季，昭苏地区和尼勒克地区的绵羊球虫感染率都在90%以上，接近于100%；两个地区绵羊球虫平均感染强度呈现出春季最高、夏季次之、秋季较低、冬季最低的流行规律。除了春季，其他季节尼勒克地区感染率均高于昭苏地区；除了冬季，其他季节尼勒克地区平均感染强度极显著高于昭苏地区(<0.01)。

2.3 绵羊消化道线虫虫卵和球虫卵囊鉴定结果

根据绵羊消化道线虫虫卵和球虫卵囊形态学特点，参照第2版《家畜寄生虫学》和第8版《Veterinary Clinical Parasitology》，初步鉴定出9种消化道线虫和12个绵羊艾美尔属(spp.)球虫(见图1和图2)。

图1 绵羊消化道线虫种类鉴定

图2 绵羊球虫种类鉴定

2.4 药物驱虫结果

驱虫前绵羊消化道线虫的感染率为92.23%，昭苏为98.31%，尼勒克为84.09%；驱虫后绵羊消化道线虫的感染率为45.63%，昭苏为28.81%，尼勒克为68.18%。昭苏地区虫卵转阴率和减少率均高于尼勒克地区，驱虫后平均感染强度极显著低于驱虫前(<0.01)(见表5)。驱虫前绵羊球虫的感染率为87.38%，昭苏为88.14%，尼勒克为86.36%；驱虫后绵羊球虫的感染率为92.23%，昭苏为92.22%，尼勒克为90.91%，驱虫后平均感染强度显著低于驱虫前(<0.05)(见表5)。绵羊消化道线虫虫卵转阴率、减少率均高于绵羊球虫，说明驱虫药的效果对绵羊消化道线虫较好。

表5 绵羊消化道线虫和球虫驱虫效果

3 讨 论

3.1 伊犁两个地区绵羊消化道线虫和球虫感染情况

本研究对伊犁昭苏地区和尼勒克地区的绵羊消化道线虫感染情况进行调查，发现感染率较高，为97.06%，平均感染强度为1274.92±2123.21个/g，最高达到42300个/g。与之前对昭苏地区绵羊寄生虫季节动态调查结果(胃肠道线虫感染率100%，平均强度1967个/g，范围12～12027个/g)较为接近，但高于新疆其他地区，如石河子地区感染率为72.34%，阜康市感染率为54.10%，乌鲁木齐县感染率为36.53%。内蒙古东部地区放牧绵羊消化道线虫平均感染率为79.2%，最高感染率达到了100%，与本研究结果较为一致；但平均感染强度为1813.2个/g，高于本研究结果。伊犁昭苏地区和尼勒克地区球虫感染率90.55%，平均感染强度为785.11±2385.73个/g，最高达到144500个/g。此结果与各地报道较为接近，如张菲菲等报道河南、山东、东北等地区的绵羊球虫感染率94.80%，总共检出12种球虫；吴坤报道西北区域羊感染球虫12种，患病率为86.8%；北京及河北的球虫患病率为88.7%，不同区域感染率有差异。王利明等对库车县绵羊球虫调查数据显示球虫感染的患病率为100%，均为混合感染。2016年阎晓菲等对新疆乌鲁木齐绵羊球虫感染调查结果显示乌鲁木齐4个季节绵羊球虫感染总患病率为71.38%，与本研究结果相比较低。

3.2 伊犁两个地区绵羊消化道线虫和球虫感染的差异性

据报道，气候变化可能会导致寄生虫流行病学和感染强度的变化，气候的区域差异对绵羊消化道线虫感染的流行病学及其地理分布有重要影响。绵羊消化道线虫的自由生活阶段受气候的强烈影响，极端的高温和寒冷对其发育和生存有害，温度升高通常会加速发育，但会增加死亡率。幼虫从粪便到牧场的发育和转化需要水分，因此降雨是感染的限制因素。这些因素共同构成了绵羊感染的季节性模式。Morgan等也报道，在欧洲，地理差异对绵羊消化道线虫不同物种流行病学具有相对重要性。本研究采样地点是昭苏地区(北纬42°38'～43°15'，东经80°10'～80°30')，位于新疆维吾尔自治区西北部，伊犁哈萨克自治州西南部，昭苏盆地为中亚腹地一个群山环抱的高位山间盆地，属大陆性温带山区半干旱半湿润冷凉气候类型，冬长夏短，年均温度3.23 ℃，年降水量507.88 mm。尼勒克地区(北纬43°25'～44°17'，东经81°85'～84°58')，气候类型接近于昭苏地区，但年均温度8.50 ℃，高于昭苏地区，年均降水量335 mm，低于昭苏地区。两个地区纬度、气温、降水不同，使两个地区的绵羊消化道线虫和球虫感染强度有极显著差异，昭苏地区绵羊消化道线虫感染强度极显著高于尼勒克地区，尼勒克地区球虫感染强度极显著高于昭苏地区。昭苏地区和尼勒克地区都属于大陆性北温带气候，春季气温的变化幅度大，秋季时间较短，冬季的温度相差也比较悬殊，表现出四季分明的气候特点。本研究绵羊消化道线虫和球虫感染强度呈现出春季最高、夏季次之、秋季较低、冬季最低的规律，其结果与两个地区的气候特点有密切的关系。此结果也与前人对北方绵羊消化道线虫感染季节动态研究的结论“春季高潮显著、秋季次之、夏季较低、冬季最低”较为一致。

3.3 绵羊消化道线虫和球虫驱虫效果差异

驱虫是综合防治中的重要环节，在新疆放牧羊只采取传统的春秋两季驱虫方法进行预防性驱虫。目前常用药物主要有大环内酯类、苯并咪唑类、咪唑并噻唑类、硝基酚类等。郭建刚报道，甘肃地区进行驱虫工作7 a时间，羊只的死亡率减少了10.8%；6～8月羔羊线虫的感染率最高，因此这3个月可加强对羔羊的驱虫。本研究中的放牧绵羊使用伊维菌素和阿苯达唑进行驱虫，对绵羊消化道线虫有一定的效果，且驱虫前后感染强度差异极显著。伊维菌素是一种重要的十六元大环内酯类抗生素类驱虫药，具有广谱、高效、安全、机体组织渗透性强、持续时间长、不易产生耐药性等诸多优点，对家畜胃肠道线虫、体外寄生虫具有良好的驱杀效果。阿苯达唑是一种广谱、高效、低毒的苯并咪唑类驱虫药，主要用于驱除胃肠道线虫，显著抑制虫卵的发育，是治疗多种蠕虫病的首选药物。但本研究发现球虫卵囊转阴率和减少率都低于虫卵，因此这两种药物不建议作为绵羊球虫感染的主要驱虫药。虽然绵羊球虫驱虫前后感染强度差异极显著，但可能是由于线虫虫卵减少使绵羊抵抗力增强，所以使绵羊球虫的感染量也相对减少。

4 结 论

本研究中伊犁两个地区绵羊消化道线虫和球虫的感染率较高，消化道线虫呈中度感染，球虫呈轻度感染。昭苏地区绵羊消化道线虫平均感染强度极显著高于尼勒克地区(<0.01)，尼勒克地区球虫感染率和平均感染强度极显著高于昭苏地区(<0.01)。两个地区绵羊消化道线虫和球虫平均感染强度呈现出春季最高、夏季次之、秋季较低、冬季最低的流行规律。驱虫药伊维菌素和阿苯达唑对绵羊消化道线虫有一定效果，但在今后防治中需要轮换用药避免耐药性，此外应增加磺胺类等球虫驱虫药。