基于磁性分子印迹材料的荧光分光光度法测定血液中同型半胱氨酸的含量

信建豪,侯巧芝,王聪颖,张利娟,张 蒙

(黄河科技学院 医学院,郑州 450063)

同型半胱氨酸(Hcy)是甲硫氨酸代谢过程中形成的一种非必需的含巯基氨基酸,血液中Hcy浓度水平升高会引起血管功能障碍,导致动脉硬化、心脑血管等疾病[1-2]。目前临床测定Hcy含量大多依赖于色谱-质谱法和免疫分析法[3-5],但这些方法都涉及繁琐的分析过程以及昂贵的试剂和仪器。分子印迹技术具有成本低、分析快速、选择性好、毒性低且模板分子可回收利用等优点[6-8],在分离检测[9]、仿生传感器[10]、食品安全[11]等领域显示出强大的发展潜力。本课题组曾用制备的分子印迹聚合物微球分离血液中的Hcy,采用紫外分光光度法进行检测,但其灵敏度未达到实际样品的检测要求[12]。因此,本工作在前期研究的基础上,通过优化工艺条件,制备了磁性分子印迹材料,用于吸附血液中的Hcy,然后选择灵敏度高、成本低的荧光分光光度法测定Hcy的含量,以该方法代替免疫分析法,对诊断高Hcy血症的相关疾病具有重要意义。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

L9型紫外-可见分光光度计;970CRT型荧光分光光度计;FA1004型电子分析天平;E30-H型电动搅拌器;Quanta FEG250型扫描电子显微镜(SEM)。

Hcy标准储备溶液:1 000 mg·L-1,准确称取DL-Hcy标准品0.1 g,用0.1%(质量分数,下同)氢氧化钠溶液溶解后,转移至100 mL容量瓶中,定容。

乙二醇二甲基丙烯酸酯、3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷、硅酸四乙酯、α-甲基丙烯酸、N-(1-芘基)马来酰亚胺标准品的纯度均不小于97%;所用氨基酸标准品的纯度均为98%;其余试剂均为分析纯;试验用水为蒸馏水。……