HIV阳性合并肛门-生殖器CA患者HPV亚型分析和复发情况研究

谈 园，罗 雯，高 飞，黄 敖，罗 宏

（长沙市第一医院，湖南 长沙 410005）

人乳头瘤病毒（Hvman Papillomavirus，HPV）是一种DNA病毒，可以感染人类皮肤和黏膜组织，特别对鳞状上皮细胞易感，能引起尖锐湿疣（Condyloma Acumina，CA）等良性病变或亚临床的恶性病变［1］。感染HPV的危险因素包括不安全性行为、使用公共浴室和免疫抑制等［2］。HPV已经发现200多个亚型，CA主要是由HPV-6/11型感染所致的肛门和外生殖器良性增生性病变，是很常见的性传播疾病，免疫力低的人群易感，如人免疫缺陷病毒（HIV）阳性患者［3，4］。CA治疗后复发率高，严重影响患者身心健康。有研究表明［5，6］，CA 患者治疗后的复发与其 HPV 亚型或者感染状态息息相关。本研究采用荧光定量PCR技 术（fluorescence quantitative PCR，FQ-PCR） 对合并HIV感染的84例CA患者进行HPV-DNA型别分析，并经CO2激光或者微波手术等方式祛除疣体，随访6个月，对其进行初步的复发相关性研究，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 2019 年 4 月至 2021 年 12 月长沙市第一医院皮肤科门诊就诊的CA患者，且HIV抗体阳性，CD4+ ＞ 200 cells/ul，HIV 病毒载量控制良好，具有典型肛门-生殖器疣的临床体征，醋酸白试验阳性，一般身体状况良好，能耐受CO2激光或微波手术，并知情同意该项研究。治疗后半年内在原发皮损部位出现新发疣体患者为CA复发。

1.2 标本采集 疣体部位用碘伏消毒后，用生理盐水浸润过的无菌拭子反复摩擦疣体表层数次，以获得皮肤表皮脱落细胞，转移至装有1ml生理盐水的灭菌试管，标记后-20℃冰箱储存备用。

1.3 治疗方法 所有患者根据疣体位置分别采用CO2激光或者微波治疗，治疗后随访六个月，前三个月每2周随访1次，后三个月每月随访1次，在随访中若发现有复发患者及时给予治疗。

1.4 仪器与试剂 美国BIO-RAD公司制造的 CFX96荧光定量 PCR 仪。硕世生物科技股份有限公司生产的HPV核酸分型检测试剂盒，共检测 21种HPVDNA 。

1.5 检测方法及型别 通过实时荧光定量PCR法检测HPV亚型，本检测试剂盒共检测21种HPV亚型，包括高危型（含中危型）18种（16，18，26，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68，73，82，53，66），低危型三种（6，11，81 ）。

1.6 检测结果的质量保障 在检测试剂盒中加入了内参基因，用于监测提取实物核酸扩增标本的质量。同时要满足内参基因检测的循环阈值（CT＜36.7），阳性对照HPV21个亚型及参考基因检测呈典型S型曲线且CT≤30，且空白对照图形中无典型S型曲线，方可认为待检测标本合格，否则本次实验定性定量结果无效。

1.7 统计分析 通过Excel表格进行数据记录和资料整理，采用SPSS19.0 软件进行统计描述，计数资料用n（%）表示。

2 结果

2.1 HPV感染情况 共84例患者，HIV抗体均为阳性，其中男性80例（占95.24%），女性4例（占4.76%），详细情况见表1。

表1 84例HIV合并CA患者一般情况

2.2 HPV分型结果 由表2可见84例HIV阳性CA患者标本中，均检出HPV，以低危11型阳性率最高（75.00%），其次为低危6型（60.71%）、高危82型（33.33%）、高危16型（30.95%）、高危18型（27.38%）、高危58型（22.62%），高危51型（20.23%）；检出低危型（6/11/81型）HPV阳性82例次（97.62%），高危型HPV 阳性78例次（92.86%）；其中低高危混合感染有76例，达90.48%。HPV单一型感染5例，感染率为5.95%，双重HPV型号感染的为4例，感染率4.76%，三重以上感染患者为75例，感染率为89.29%，见表3。

表2 84 例病例中各HPV亚型阳性率

表3 84例病例HPV亚型多重感染率

2.3 复发相关因素 就诊患者均为HIV感染者，总体复发率高达96.42%，其中男性复发率为98.75%，女性复发率为50.00%；肛周复发率为100%，男性尿道口复发率66.67%；就诊年龄以（21～30）岁为主，有53例（63.10%），其次（31～40）岁有16例，20岁及以下有8例，40岁以上有7例，HPV阳性率分别为19.05%、9.52%、8.33%。此外，未复发的3例病例均为单一型感染，多重感染的复发率达100%。

3 讨论

性传播疾病是一个重要的公共卫生问题，可以同时促进HPV和HIV的传播。HPV为小分子双链DNA病毒，对人类的皮肤以及黏膜具有很高的亲嗜性，目前已知的HPV亚型有200多种，其中有30多种亚型可以通过性接触传播［7，8］。其致癌的风险程度被分为高危型和低危型，而其中有15个亚型的HPV持续感染被认为具有致癌风险，包括 16，18型等，并与皮肤鳞状上皮细胞癌有关，如宫颈癌；低危型HPV 包括 6，11等型号，可以导致肛周-生殖器疣等鳞状上皮性增生［9，10］。HIV感染者免疫力低下，且感染者多有男男同性性行为，较HIV阴性患者更易感染HPV，而目前针对HIV阳性合并肛周-生殖器疣患者HPV 基因型的研究甚少。

本研究的84例HIV阳性合并CA 患者疣体部的HPV实时荧光定量PCR均检出HPV，感染部位以男性肛门、肛管感染为主。 HPV分型方面 HPV11型是感染率最高的亚型，其次分别为 HPV6型、82型、16型及 18型。有研究表明［11，14］，HIV 感染者经过抗病毒治疗后，其他病原体包括真菌或者细菌的条件性感染概率有所下降，而HPV感染率呈上升趋势，同时肛周及宫颈上皮癌变率升高，本研究中虽然患者治疗CA时，HIV病毒载量控制良好，但其各型号感染率均明显高于单纯CA患者，究其原因，可能依然与患者合并有HIV感染，免疫力相对较差有关［15］。既往研究显示［16］，在高危型中CA 患者HPV16/18型以及52型的感染率最高，仅次于6 /11型 ，而本研究显示HPV82型的感染率排在HPV6/11型之后，表明其感染型号的差异可能具有一定的地域性，也可能与HIV阳性患者对HPV82型易感有关。本实验结果中多重感染同样多见，且三重感染以上占到89.29%，且多为高低危混合型，而在其他研究中虽然CA 患者 HPV 感染常见同样为多重感染［11，12，16］，但多重感染的感染率远低于本研究人群。

本研究中，CA的总体复发率极高，提示HIV阳性为CA复发的高风险因素，而既往研究中单纯CA复发的危险因素可能也对HIV阳性患者的复发有一定影响，比如情绪，抽烟和熬夜等因素［5，6］。多重感染的复发率达100%，而多重感染患者均合并有高危型HPV（high-risk HPV，HR-HPV）的感染，高复发率导致HR-HPV的持续感染，会增加感染部位上皮内瘤变及肛门癌的风险［17，18］，提示HIV阳性患者感染HPV后可能更易癌变，应引起重视。此外，本研究结果显示HIV阳性的CA患者中肛周及肛内的HPV感染率及复发率均极高，而其高复发率可能仍然与HIV阳性患者的抵抗力有关，是否存在肛门黏膜易感，消化系统菌群刺激等其他因素，有待进一步研究。

综上所述，HIV阳性的CA患者，感染型号多为三重以上的多重感染，且复发率更高，临床发现易复发的HPV型号呈多重感染的CA患者时应引起重视，排除HIV感染，同时为减少HPV的传播，降低癌变风险，建议对未感染HPV的HIV感染者接种4价或者9价HPV疫苗。