微丝附着梁蛋白与血管内皮生长因子在乳腺癌中的表达及意义

郑 毅，丁保锋，候玉龙

(佳木斯市中心医院东院区肿瘤外二科，黑龙江 佳木斯 154002)

我国乳腺癌发病率较高，是危害我国女性健康的主要恶性肿瘤之一，临床根据患者病情不同治疗方式有所差异，因此及早筛查诊断并给予对症治疗对患者而言意义重大[1]。乳腺癌隐匿性极强，良恶性乳腺肿瘤患者症状无显著差异，影像学诊断图像亦具有较高相似性，极易与良性乳腺肿瘤混淆，延误患者最佳治疗时机[2]。病理学检查因其有创性难以成为临床乳腺癌常规筛查方式，而血液学指标的运用有望为乳腺癌的筛查、诊断及治疗提供科学参考依据，肿瘤标志物是目前临床乳腺癌诊治中的常用评估指标。血管内皮生长因子(VEGF)则与人体血管形成与通透性调节关系密切，在肿瘤发生与发展过程中发挥着重要作用[3]。微丝附着梁蛋白(Girdin)是一种与细胞迁移和细胞骨架重组有关的肌动蛋白结合蛋白，近年来有研究指出Girdin或参与了癌细胞的增殖与转移过程，对于乳腺癌的诊治具有重要意义[4]。Girdin和VEGF均与乳腺癌发生和发展有关，但目前临床仍没有关于Girdin和VEGF在乳腺癌淋巴结转移与血管生成中的作用的有关报道，限制了乳腺癌诊断与病情评估准确率的进一步提高。本研究探讨Girdin与VEGF在乳腺癌中的表达意义。

1 资料与方法

1.1一般资料:收集2020年1月～2022年1月佳木斯市中心医院40例乳腺癌患者与80例良性乳腺腺病患者病理组织标本，所有患者在我院接受手术治疗与手术病理检查。纳入标准：①乳腺癌患者符合《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范(2019年版)》[5]诊断标准；②所有患者接受手术病理检查与免疫组化检查；③患者自愿参与研究。排除标准：①先天性免疫缺陷病；②合并其他部位恶性肿瘤；③合并脏器功能严重损伤；④合并精神疾病，依从性差；⑤合并其他乳腺病变。其中乳腺癌患者：年龄45～77岁，平均(67.38±3.42)岁；体重指数20～32 kg/m2，平均(24.26±2.53)kg/m2；基础疾病：肥胖11例(27.50%)、高脂血症15例(37.50%)、糖尿病15例(37.50%)。良性乳腺腺病患者：年龄46～75岁，平均(68.12±3.55)岁；体重指数20～33 kg/m2，平均(25.05±2.76)kg/m2；基础疾病：肥胖20例(25.00%)、高血压27例(33.75%)、糖尿病28例(35.00%)。两组患者基线资料差异无统计学意义(P>0.05)。本次研究经过本院医学伦理委员会同意。

1.2方法:采用免疫组织化学SP方法测定所有受试者病理组织中的Girdin与VEGF表达情况，所有操作严格按照说明书进行；实验仪器与试剂：恒温可控式干燥箱、轮转式切片机、 MP120-2电子分析天平、电热恒温水浴箱、HI220烘片机、隔热式电热培养箱、80-2离心机、HI220摊片机、 BI-2000医学图像分析仪、BH-2 OLYMPUS显微镜、兔抗人VEGF单克隆抗体、二氨基联苯胺(DAB)显色剂试剂盒、兔抗人Girdin单克隆抗体、 通用型SP免疫组化广谱试剂盒。结果判读：选取受试者病理切片在5个高倍镜下进行观察，根据受试者5个高倍镜视野下100个肿瘤细胞的染色数量与染色程度进行结果判读，满足标准[6](5个高倍视野下，100个肿瘤细胞中超过10个细胞染为浅黄色、超过5个细胞染为棕黄色、超过3个细胞染为棕褐色)即判定为Girdin或VEGF阳性。分析Girdin与VEGF在乳腺腺病和乳腺癌组织中的表达情况；分析不同Girdin、VEGF表达情况的乳腺癌患者临床病理特征差异。

1.3统计学方法:采用SPSS22.0软件进行t检验与χ2检验。

2 结果

2.1Girdin与VEGF在乳腺腺病和乳腺癌组织中的表达情况:免疫组化结果显示，乳腺癌患者病理组织中的 Girdin阳性率与VEGF阳性率均高于良性乳腺腺病患者(P<0.05)。见表1。

表1 Girdin与VEGF在乳腺腺病和乳腺癌组织中的表达情况[n(%)]

2.2乳腺癌患者Girdin和VEGF表达情况与临床病理特征分布： Girdin阳性的乳腺癌患者与 Girdin阴性的患者间年龄、分化程度、体重指数、HER-2阳性差异无统计学意义(均P>0.05)，临床分期、淋巴结转移、肿瘤大小差异有统计学意义(均P<0.05)。VEGF阳性的乳腺癌患者与VEGF阴性的患者间年龄、体重指数差异无统计学意义(均P>0.05)，分化程度、临床分期、淋巴结转移、肿瘤大小、HER-2阳性差异有统计学意义(均P<0.05)。见表2。

表2 乳腺癌患者Girdin和VEGF表达情况与临床病理特征分布(n)

3 讨论

乳腺癌早期患者常无特异性症状，随着病情进展会出现乳房肿块、乳房及皮肤异常等症状，中晚期患者可因病灶转移产生不同的伴随症状，是一种严重危害女性身心健康的多发性恶性肿瘤[7]。与大多数癌症一样，乳腺癌晚期患者癌细胞具有较高转移风险，进一步降低患者5年生存率，因此及早进行诊断并开展对症治疗对患者而言具有重要意义。乳腺癌发病机制尚未完全明确，研究指出乳腺癌的发生或与遗传因素、全身性慢性疾病、乳腺肿块、环境因素等均存在关联，因此临床尚缺乏乳腺癌的血液学特异性诊断指标[8-9]。现阶段临床诊断乳腺癌仍以病理学检查为金标准，通过对病变组织进行取样检查可对乳腺癌类型、分期、分化等级、浸润程度等进行精确评估，但病理检查须对患者组织样本进行取样，取样过程可能导致患者健康组织损伤，限制了其在临床的大范围应用。在众多乳腺癌检查方式当中，肿瘤标志物检查是临床应用最广泛的乳腺癌诊断与病情评估方式之一[10]。

本研究结果表明Girdin蛋白与VEGF在乳腺癌组织中程高阳性表达，Girdin阳性乳腺癌患者与Girdin蛋白阴性乳腺癌患者的临床分期、淋巴结转移情况等病理特征差异显著；而VEGF阳性乳腺癌患者的分化程度显著低于VEGF阴性乳腺癌患者，与张亮杰等的研究[11]相似，表明Girdin与VEGF可能在乳腺癌细胞的生长与转移中发挥了促进作用。分析原因，这是由于VEGF是一种作用于内皮细胞的血管通透因子，其在人体创伤修复、胚胎发育、骨形成改建以及心脑血管疾病的病理性血管形成等方面均发挥了重要的生理作用；不仅如此，现代病理学研究显示VEGF还参与了肿瘤新生血管的形成过程中，因此其表达水平与癌症患者癌细胞生长与转移也具有较高的关联性[12]。而Girdin与细胞迁移和细胞骨架重组有关，其能够被Akt/蛋白激酶B激活从而参与到细胞的增殖与凋亡进程之中，从而促进VEGF依赖的内皮细胞迁移，降低乳腺癌患者预后水平。